Göni RT-qPCR Kit II
Kitiň beýany:
◮Göni RT-qPCR toplumy, üýtgeşik reaksiýa buferi bilen Foregene tarapyndan işlenip düzülen Foreasy Reverse Transcriptase we Foreasy HS Taq DNA polimerazyny ulanyp, bu toplumy berk garşylyk we sazlaşykly edýär we şablon hökmünde Foregene Lizis ulgamyny ulanyp, reaksiýany synagdan geçirip biler.Bu toplum, COVID-19 nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumy we beýleki patogen bakteriýalar nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumyny döretmek üçin ulanylyp bilner.
Düşündiriş
Göni RT-qPCR Kit aýratyn gaplanan RT-qPCR buferini, ýokary netijeli Foreasy HS Taq DNA polimerazyny üpjün edýärwe Foreasy ters transkriptaz (MMLV),ýönekeý barlagyň içinde yzky toplumlary döretmek we ulgamy sazlamak üçin amatly etmek.
Göni RT-qPCR toplumy, üýtgeşik reaksiýa buferi bilen Foregene tarapyndan işlenip düzülen Foreasy Reverse Transcriptase we Foreasy HS Taq DNA polimerazyny ulanyp, bu toplumy berk garşylyk we sazlaşykly edýär we şablon hökmünde Foregene Lizis ulgamyny ulanyp, reaksiýany synagdan geçirip biler.Bu toplum, COVID-19 nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumy we beýleki patogen bakteriýalar nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumyny döretmek üçin ulanylyp bilner.
Bu toplum aňsat we çalt ulanyp, gönüden-göni IVD önüminiň düzüm bölegi bolup biler.Diňe täzeden barlamazdan, aňsat barlamak gerek.
Aýratynlyklary
500T, 50,000T
Kit komponentleri
| Kitiň mazmuny (20 μL reaksiýa ulgamy) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T. | 50,000 T. | |
| Foreasy R.hemişelik transkriptaz (200 U /μL) | 50 μL× 1 | 1 ml× 5 |
| Foreasy HS Taq DNK polimeraza (5 U /μL) | 100 μL× 1 | 1 ml× 10 |
| 2 RT Göni RT-qPCRBufer | 1 ml × 5 | 500 ml × 1 |
| Görkezme | 1 | 1 |
Işleýiş ädimleri
J: Şablon we reagent taýýarlaň
1. Taýýarlanan RNK şablonyny taýýarlaň (RNA şablonyny çykarmak we arassalamak üçin Foregene Total RNA izolýasiýa toplumy toplumyny ulanmak maslahat berilýär) ýa-da döwüji önümi (Foregene Lizis ulgamyny ulanmak maslahat berilýär), ýörite desgalar (10 μM) we beýleki degişli sarp ediş materiallary, gural.
2. 2 × göni RT-qPCR buferini, RNase-ddH2O we 20 × ROX salgylanma boýagyny (zerur bolsa) buz bilen gutujyga salyň, bulary tebigy eredip, ýuwaşlyk bilen garyşdyryň.
B: RT-qPCR ulgamyny taýýarlaň
Reaksiýa ulgamynyň reaksiýa buferiniň göwrüminiň ýarysyny alyň (mysal üçin ulgamyň göwrümi 20 μL bolsa, 10 μL 2 × göni RT-qPCR bufer almaly). Üçindegişli mukdarda ferment, muny teklip edýärisM-MLV ： 10-30 U / 20 μL reaksiýa ulgamy,TakDNK polimeraza：1-2 U / 20 μL reaksiýa ulgamybu biziň teklibimiz, synap görmeli we sazlamaly), RNK şablonyny, ýörite primerleri we zondlary goşuň we RNase-Free ddH goşuň2O 20 μL.RT-qPCR reaksiýa ulgamynyň ýörite taýýarlanyşyny aşakdaky tablisa 1 görkezip bolar.
1-nji tablisa: RT-qPCR ulgamyny taýýarlaň
| Komponent | Ses | Ahyrky konsentrasiýa |
| 2 RT Göni RT-qPCR buferi | 10 μL | 1 × |
| Foreasy ters transkriptaz (MMLV) | 10-30 U. | |
| Foreasy HS Taq DNK polimeraza | 1-2 U. | |
| Forward Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Ters primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Synag (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Şablon (RNA ýa-da Lizate) | X μL | |
| 20 × ROX salgylanma boýagy | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Jemi göwrüm | 20 μL |
Bellik: Forward Primer we Ters Primer maksatly geniň aýratyn başlangyçlarydyr.QPCR ulgamy amaly synag we PCR modellerine görä sazlanyp bilner.Astarlaryň köpüsiniň jemleýji konsentrasiýasy üçin 400nM maslahat berýäris.Specificörite primerleriň we zondlaryň göwrümini taýýarlanan konsentrasiýa we maslahat berilýän jemleýji konsentrasiýa laýyklykda sazlaň.
1 *: Dürli mukdarda PCR gurallaryna görä ROX salgylanma boýagynyň iň soňky konsentrasiýasyny saýlaň.Iň amatly ROX salgylanma Boýag umumy mukdarda PCR gurallarynyň konsentrasiýasy aşakdaky tablisada görkezilýär:
| Mukdar PCR gurallary | ROX salgylanma boýagynyň jemleýji konsentrasiýasy |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT / Birinji ädim,we ş.m. | 1 × (mysal üçin, 20 μL reaksiýa ulgamyna 1μl 20 × ROX salgylanma boýagyny goşuň) |
| ABI 7500, 7500 Çalt, Stratagen Mx3000P, Mx3005P we Mx4000 we ş.m. | 0,5 × (mysal üçin, 20 μL reaksiýa ulgamyna 0,5μl 20 × ROX salgylanma boýagyny goşuň) |
| Roche PCR guraly, Bio-Rad PCR gural, Eppendorf mukdar PCR gural we ş.m. | ROX salgylanma boýagy bolmasa |
Saklamak we ýaramlylyk möhleti
Kitap -20 ± 5 at derejesinde saklanmalydyr.Derrew -20 ℃ termostatik sowadyjyda saklamaly.Amatly ýagdaýda saklansa, ulanyş möhleti 2 ýyl.
