Göni RT-qPCR toplumy
Kitiň beýany:
◮ Göni RT-qPCR toplumy, üýtgeşik reaksiýa buferi bilen Foregene tarapyndan işlenip düzülen Foreasy Reverse Transcriptase we Foreasy HS Taq DNA polimerazyny ulanyp, bu toplumy berk garşylyk we sazlaşykly edýär we şablon hökmünde Foregene Lizis ulgamyny ulanyp, reaksiýany synagdan geçirip biler.Bu toplum, COVID-19 nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumy we beýleki patogen bakteriýalar nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumyny döretmek üçin ulanylyp bilner.
Düşündiriş
Göni RT-qPCR Kit aýratyn gaplanan RT-qPCR buferi we ýokary täsirli ferment bilen üpjün edýärgaryndy (Taq 、 M-MLV 、 RI) back yzky toplumlary we ulgamy döretmek üçin amatly edýärsazlamak simple ýönekeý barlagyň içinde.
Aýratynlyklary
500T, 50,000T
Kit komponentleri
| Kitiň mazmuny (20 μL reaksiýa ulgamy) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T. | 50,000 T. | |
| Göni ferment garyndysy | 500 μL× 1 | 50 ml× 1 |
| 2 RT Göni RT-qPCR buferi | 1 ml× 5 | 500 ml× 1 |
| Görkezme | 1 | 1 |
Işleýiş ädimleri
Reagent taýýarlanmazdan ozal, toplumdaky ähli reagentleri otag temperaturasynda eremeli we ýuwaşlyk bilen garmaly.
A: Taýýarlaň of şablon we reagent
1. Taýýarlanan RNK şablonyny taýýarlaň (RNA şablonyny çykarmak we arassalamak üçin Foregene Total RNA izolýasiýa toplumy toplumyny ulanmak maslahat berilýär) ýa-da döwüji önümi (Foregene Lizis ulgamyny ulanmak maslahat berilýär), ýörite desgalar (10 μM) we beýleki degişli sarp ediş materiallary, gural.
2. 2 × göni RT-qPCR buferini, RNase-ddH2O we 20 × ROX salgylanma boýagyny goýuň (eger bar bolsa)'zerur) buz bilen gutyda, bulary tebigy eredýär we ýuwaşlyk bilen garyşdyrýar.
B: Taýýarlaň of RT-qPCR ulgamy
Tablisa 1 : Taýýarlaň of RT-qPCR system
| Komponent | Ses | Ahyrky konsentrasiýa |
| 2 RT Göni RT-qPCR buferi | 10 μL | 1 × |
| Göni ferment garyndysy | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Ters primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Synag (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Şablon (RNA ýa-da Lizate) | X μL | |
| 20 × ROX salgylanma boýagy | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Jemi göwrüm | 20μL |
C: Set the RT-qPCR reaksiýa programmasy
Tablisa 2 : RT-qPCR reaktion programmasy sazlamak (üçin mysal: iki-ädim usuly)
| Stepdim | Temperatura | Wagt | Sikller | Mazmuny | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Tersine transkripsiýa |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Denaturasiýa | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturasiýa | |
| 60 ℃ | 30 sek 2 * | Anneal / giňeltme | |||
Saklamak we ýaramlylyk möhleti
- Kitap -20-de saklanmalydyr± 5℃.Möhleti 12 aý.
- Doňdurma eriş sikllerinden gaça duruň (<5 sikl).
