A260 / A230-nyň pes gatnaşygy, adatça iň ýokary siňdiriş tolkun uzynlygy 230nm bolan hapalar sebäpli ýüze çykýar.Bu hapalaryň nämäni öz içine alýandygyny göreliň:

• Adaty hapalaýjy maddalar	Absorbsiýa tolkun uzynlygy	Gatnaşyk täsiri
  Belok	~ 230nm we 280nm	A-nyň bir wagtda azalmagy260/A 280we A.260/A 280gatnaşygy
  Guanidin duzy	220-240 nm	A azaltmak260/A 280gatnaşygy
  Fenol	~ 270nm	-
  Trizol	~ 230nm we 270nm	A azaltmak260/A 280gatnaşygy
  EDTA	~ 230nm	A azaltmak260/A 280gatnaşygy
  Etanol	230-240 nm	A azaltmak260/A 280gatnaşygy

 
 
 
Absorbsiýa tolkun uzynlygy we umumy hapalaýjy maddalaryň kontrast bahasy

Protein hapalanmagy
Beloklaryň hapalanmagy, nuklein kislotasyny çykarmak prosesinde iň köp ýaýran hapalanma hökmünde kabul edilip bilner.Belok ýokarky suw fazasy bilen aşaky arasynda barorganikifazasy.Hapalanmak, şol bir wagtyň özünde A260 / A280 we A260 / A230 gatnaşygy azaldar we A260 / A230 gatnaşygy A260 / A280 gatnaşygyndan has aýdyň üýtgär.
Ondan soňters transkripsiýaor qPCR reaksiýalary, belok galyndylary fermentleriň işine päsgel berip ýa-da päsgel berip biler.Beloklaryň hapalanmagynyň öňüni almagyň iň oňat usuly, adatdan daşary tebigata ymtylanda “köp däl, az mukdarda” ýörelgesini ýatda saklamakdyr.

2. Guanidiniň hapalanmagy
gidroklorid (GuHCl) we guanidin tiosýanat (GTC) beloklaryň denatirlemegine täsir edýär, nuklein kislotasyny çykarmak prosesinde öýjük membranalaryny çalt ýok edip, beloklaryň denaturasiýasyna we ýagmagyna sebäp bolýar.GuHCl we GTC-iň siňdiriş tolkun uzynlygy 220-240 nm, wegalyndy guanidinium duzy A260 / A230 gatnaşygy azaldar.Galyndy guanidinium duzy gatnaşygy azaldar,aşaky synaglara täsiri aslynda ujypsyz.

3. Trizol hapalanmagy
Trizolyň esasy düzüm bölegi fenol.Fenolyň esasy wezipesi öýjükleri lizlemek we öýjüklerde beloklary we nuklein kislotasy maddalaryny çykarmakdyr.Fenol beloklary netijeli kesgitläp bilýän hem bolsa, RNase işjeňligini doly saklap bilmeýär.Şonuň üçin endogen we ekzogen RNazyň öňüni almak üçin TRIzol-a 8-gidroksikinolin, guanidin izotiosýanat, mer- merkaptoanol we ş.m. goşulýar.
Öýjükli RNK çykarylanda, Trizol öýjükleri çaltlaşdyryp we öýjüklerden çykýan nukleazany saklap bilýär we Trizol galyndysy A260 / A230 gatnaşygy ep-esli azaldar.
Gaýtadan işlemegiň usuly: Merkezden gaçyrylanda, Trizoldaky fenolyň 4 ° we otag temperaturasy bilen suw fazasynda aňsat eräp biljekdigini bellemelidiris.

4. Etanol galyndysy
Etanol, DNK bilen baglanyşykly bolup biljek duz ionlaryny eritmek bilen, DNK-ny çökdürmek üçin ulanylýar.Iň ýokary siňdiriş tolkun uzynlygysiňdiriş derejesietanol hem 230-240 nm aralykdaA260 / A230 gatnaşygy hem azaldar.
Etanol galyndylaryndan gaça durmagyň usuly, soňky elitasiýa wagtynda iki gezek gaýtalanyp bilnertüsse kapotelitasiýa üçin bufer goşmazdan ozal, etanolyň doly bugarmagyna ýol bermek üçin iki minutlap.
Şeýle-de bolsa, bu gatnaşygy diňe RNK hiline baha bermek indeksidir.Aboveokarda agzalan amallar berk düzgünleşdirilse, gatnaşygy bilen adaty diapazonyň arasyndaky gyşarmak aşaky synaglara uly täsir etmez.
Degişli önümler:
Haýwanlaryň jemi RNA izolýasiýa toplumy
Ösümlik jemi RNA izolýasiýa toplumy
Öýjük jemi RNA izolýasiýa toplumy
Ösümlik jemi RNA izolýasiýa toplumy