Polisakaridlere we polifenollara baý ösümlik üçin jemi RNA izolýasiýa toplumy jemi RNA Purificaiton toplumy
Kitiň beýany:
Pişik.No.RE-05021 / 05022/05024
Jemi RNK-ny ýokary polisakarid we polifenol komponentleri bolan umumy ösümlik nusgalaryndan arassalamak üçin.
Polisakaridleriň we polifenollaryň köp mukdary bolan ösümlik nusgalaryndan ýokary hilli jemi RNK-ny çalt çykaryň.
DNK-arassalaýjy sütüni ulanyp, RNase-erkin
Pleönekeý - ähli amallar otag temperaturasynda tamamlanýar
Çalt - amal 30 minutda tamamlanyp bilner
Ygtybarly - hiç hili organiki reagent ulanylmaýar 
Aýratynlyklary
50 Taýýarlyk, 200 Taýýarlyk
Kitapda ýokary polisakaridler ýa-da polifenollar bolan dürli ösümlik dokumalaryndan ýokary arassalygy we ýokary hilli jemi RNK-ny netijeli çykaryp bilýän Foregene tarapyndan işlenip düzülen aýlaw sütüni we formulasy ulanylýar.Adatdan daşary we dokuma lizatasyndan genom DNK-ny aňsatlyk bilen aýryp bilýän DNK-arassalaýjy sütün bilen üpjün edýär.Diňe RNK sütüni RNK-ny netijeli baglanyşdyryp biler.Kitap bir wagtyň özünde köp sanly nusgany gaýtadan işläp biler.
Tutuş ulgamda RNase ýok, şonuň üçin arassalanan RNK peselmez.Bufer PRW1 we Buffer PRW2 alnan RNK-nyň belok, DNK, ionlar we organiki birleşmeler bilen hapalanmazlygyny üpjün edip biler.
Kit komponentleri
| Bufer PSL1, Bufer PS, Bufer PSL2 |
| Bufer PRW1, Bufer PRW2 |
| RNase-ddH2O, DNK arassalaýjy sütün |
| Diňe sütün |
Aýratynlyklary we artykmaçlyklary
Ice Buzly hammam we pes temperatura merkezden gaçyryşsyz, tutuş prosesiň dowamynda otag temperaturasynda (15-25 ℃) işlemek.
RN Doly toplum RNase-Free, RNK-nyň zaýalanmagy barada alada etmegiň zerurlygy ýok.
R Polisakaridleriň we polifenollaryň ösümlik nusgalaryndan RNK-ny arassalamak üçin aýratyn amatly.
■ DNK arassalaýjy sütün, DNase goşmazdan genom DNK hapalanmagyny aýryp biler ýaly, DNK bilen aýratyn baglanyşýar.
R RNokary RNK hasyllylygy: Diňe RNK sütüni we üýtgeşik formula RNK-ny arassalap biler.
■ Çalt tizlik: işlemek aňsat we 30 minudyň içinde tamamlanyp bilner.
■ Howpsuzlyk: hiç hili organiki reagent talap edilmeýär.
■ qualityokary hilli: Arassalanan RNK bölekleri ýokary arassa, belok we beýleki hapalardan mahrumdyr we dürli aşaky synag synaglaryna laýyk bolup biler.
Önümiň parametrleri
■ Aşakdaky programmalar: birinji hatar cDNA sintezi, RT-PCR, molekulýar klonlaşdyryş, Demirgazyk Blot we ş.m.
Ample Mysal: polisakaridleriň we polifenollaryň täze ýa-da doňan ösümlik dokumalary
Os Doz: 50mg ösümlik dokumasy
Arassalaýyş sütüniniň iň ýokary RNK baglaýjy kuwwaty: 80 μg
Ution Elýusiýanyň göwrümi: 50-200 μl
Kit toplumy
Highokary polisakarid we polifenol düzümi bolan täze ýa-da doňdurylan ösümlik dokumalarynyň nusgalaryndan (esasanam täze ösümlik ýaprak dokumasy) umumy RNK çykarmak we arassalamak üçin amatlydyr.
Iş akymy
Diagramma
Ösümlik jemi RNA izolýasiýa toplumy polisakaridleriň we polifenollaryň 50mg täze ýapraklaryny gaýtadan işledi we 5% arassalanan RNK elektroforez tarapyndan synag edildi.
1: Banan
2: Ginkgo
3: Pagta
4: Nar
Saklamak we ýaramlylyk möhleti
Bu toplum 24 aýlap gurak şertlerde otag temperaturasynda (15-25 ℃) saklanyp bilner;has uzak wagtlap saklamaly bolsa, 2–8 in saklap bolýar.
Bufer PSL1 β-merkaptoetanol goşulandan soň 1 aýyň dowamynda 4 at ýerleşdirilip bilner (synag wagtynda şol bir wagtda goşmak maslahat berilýär).
Sütün dakyldy
Sütün dakylansoň, RNK hasyllylygy azalýar ýa-da RNK-ny arassalamak mümkin däl, alnan RNK massasy pesdir.
Umumy sebäpleriň derňewi:
1. Mysal arakesmeleri düýpli däl.
Mysal döwülmegi, RNK hasylyna we hiline täsir edip, DNK-TERJIME EDIP BOLANOK.Nusgalary döweniňizde, ýeterlik suwuk azotda çalt üwemek işini maslahat berýäris, öýjük diwaryny, öýjük membranasyny we beýleki dokumalary döwmäge synanyşyň.Poliol polisakaridleriň ösümlik nusgalary üçin, “Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS” -ny ulanmagy maslahat berýäris.
2. Aýrylan nusga adatdan daşary tebigaty DNK-arassalaýjy sütün bilen emdirilende, öýjüklere bölünen çökündiler dem almagy mümkin.
Alnan öýjük bölek-bölek çökündiler, RNK-nyň diňe sütünine sebäp bolar, RNK adsorbsion amallary ýerine ýetirilende petiklener (6-njy ädime serediň).Öýjük galyndylarynyň sorulmazlygy üçin bu adatdan daşary tebigaty emdireniňizde seresaplylyk bilen maslahat berýäris.
3. Başlangyç mukdary gaty köp.
Artykmaç nusga ulanylyşy, Buffer PSL1 tarapyndan doly däl böleklere ýa-da doly däl öýjük lizisine, arassalama wagtynda arassalaýyş sütüniniň petiklenmegine getirer.Ösümlikleriň jemi RNA izolýasiýa toplumy Her arassalanan iş nusgasy 50 mg.Poliol polisakaridleriň ösümlik nusgalary üçin, “Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS” -y synap görmegiňizi maslahat berýäris.
4. Merkezden gaçyryş temperaturasy gaty pes.
Rhli RNK izolýasiýa we arassalama prosesi otag temperaturasynda (20-25) amala aşyrylýar°C), nusga dokumasynyň suwuk azot bilen döwülmeginden başga. Käbir kriogen sentrifugalaryň temperaturasy 20-den pesdir℃DNK-arassalaýjy sütüniň we / ýa-da diňe RNK sütüniniň petiklenmegine sebäp bolup biler.Şeýle ýagdaý ýüze çyksa, sentrifuganyň temperaturasyny 20-25 edip düzüň℃, weliz garyndysynyň we / ýa-da etanol goşulan adatdan daşary tebigatyň 37-e çenli gyzdyrylandygyna göz ýetiriň°C.
Hiç hili RNK alynmaýar ýa-da RNK hasyllylygy pes däl
Adatça dikeldiş netijeliligine täsir edýän köp faktor bar, mysal üçin: RNK mazmuny, iş usuly, elitasiýa göwrümi we ş.m.
Aşakdaky ýaly umumy sebäpleriň derňewi:
1. Amal wagtynda buz hammamynda ýa-da pes temperaturada (4 ° C) merkezden gaçyryş çäresi geçirildi.
Teklip: Otag otagynda (15-25) işlediň°C) tutuş prosesde buz wannasyny we pes temperatura merkezden gaçyrma.
2. Nusganyň nädogry saklanmagy ýa-da nusganyň uzak wagtlap saklanmagy sebäpli RNK peseldi.
Teklip: Täze ýygnanan nusgalar suwuk azotda çalt doňdurylmaly, soňra -80 ° C uzak wagtlap saklanmaly, nusgalaryň gaýta doňmagyndan we eremeginden gaça durmaly;ýa-da nusgalary derrew RNA stabilizatory RNAlater erginine (haýwanlaryň nusgalary) siňdiriň.
3. Mysal üçin böleklere bölünme we liz arassalaýyş sütüniniň petiklenmegine sebäp bolýar.
Teklip: Dokumany üwende, dokumanyň ýeterlik derejede ýerdedigine göz ýetiriň we öňünden taýýarlanan Buffer PSL1-e çalt geçiriň (β-ME-nyň dogry paýynyň goşulandygyny tassyklaň, proseduranyň 1-nji ädimine serediň).
4.Eluent nädogry goşuldy.
Teklip: RNase-erkin ddH2O arassalaýjy sütün membranasynyň ortasyna gaçandygyna göz ýetiriň.
5.Buffer PSL2 ýa-da Buffer PRW2-e mutlak etanolyň dogry mukdary goşulmady.
Teklip: Görkezmelere eýeriň, Buffer PSL2 we Buffer PRW2-e dogry mukdarda etanol goşuň we toplum ulanylmazdan ozal gowy garmaly.
6. Dokuma nusgasynyň mukdary ýerliksizdir.
Teklip: Bufer PSL1-den 500 μl üçin 50 mg dokuma ulanyň.Dokumany aşa köp ulanmak, alnan RNK mukdaryny azaldar we emele gelen RNK-nyň arassalygy hem peseler.Başlangyç nusga dozasynyň RNK çykarmak amallary üçin 50 mg-dan ýokary bolmaly däldigini maslahat berýäris.
7. operliksiz elitasiýa göwrümi ýa-da doly däl elitasiýa.
Teklip: Arassalaýyş sütüniniň uzynlygy 50-200 μl;elitasiýa effekti kanagatlanarly däl bolsa, 5-10min ýaly gyzdyrylan RNase-Free ddH2O goşulandan soň otag temperaturasynda wagty uzaltmak maslahat berilýär.
8. Arassalaýyş sütüninde BufferPRW2 bilen ýuwlandan soň etanol galyndysy bar.
Teklip: Boş turba 1 minut merkezden gaçyrylan bolsa we Buffer PRW2-de ýuwlandan soň etanol galan bolsa, boş turba merkezden gaçyryş wagtyny 2 minuta çenli artdyryp bilersiňiz, ýa-da galyndy etany doly aýyrmak üçin arassalaýyş sütünini otag temperaturasynda 5 minut goýup bilersiňiz.
9. Kitap nädogry ulanyldy.
Teklip: Polifenolik polisakaridleriň ösümlik nusgalary üçin, “Plant Total RNA izolýasiýa toplumy” ýaly umumy toplumlary ulanmak ideal RNK nusgalaryny alyp bilmez.Polifenolik polisakarid ösümlikleriniň nusgalary üçin ýörite döredilen “Plant Total RNA IsolationKit Plus” -ny ulanmagy maslahat berýäris.Polifenoldan we polisakarid ösümlikleriniň nusgalaryndan RNK almak üçin ýörite işlenip düzülen toplum.
OD260 / OD280 bahasy pes
DdH2O bilen RNK elýusiýasy we spektrofotometr okamak üçin ulanylýan pes OD260 / OD280 bahalaryna getirýär.OD260 / OD280 bahalaryny has dogry almak üçin 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (RNK-dan erkin ddH2O däl) ulanmagy maslahat berýäris, 19-njy sahypadaky “RNA konsentrasiýasy we arassalaýyş barlaglary”.
Arassalanan RNK zaýalanýar
Arassalanan RNK-nyň hili, nusga gorap saklamak, RNase hapalanmagy we manipulýasiýa ýaly faktorlar bilen baglanyşykly.
Umumy sebäpleriň derňewi:
1. Dokma nusgalary ýygnanandan soň wagtynda saklanmady.
Teklip: Dokumanyň nusgalary ýygnanandan soň ulanylmasa, derrew suwuk azotda pes temperaturada saklaň ýa-da suwuk azotda çalt doňandan soň uzak wagtlap saklamak üçin -80 ° C-e geçiriň ýa-da nusgalary derrew RNA stabilizatory RNAlater erginine (haýwan nusgalary) çümdüriň.RNK çykarmak üçin täze ýygnanan dokuma nusgalaryny ulanmaga synanyşyň.
2. Dokuma nusgalarynyň gaýtalanmagy we doňmagy.
Teklip: Dokuma nusgalaryny saklanyňyzda, olary saklamak üçin ownuk böleklere bölüp, nusgalaryň yzygiderli doňmagy we eremegi sebäpli RNK-nyň zaýalanmagynyň öňüni almak üçin ulananyňyzda iň gowusydyr.
3.RNase operasiýa otagynda girizilýär ýa-da bir gezek ulanylýan ellikler, maskalar we ş.m.
Teklip: RNK çykarmak synaglary aýratyn RNK amallarynda iň oňat ýerine ýetirilýär we synagdan öň laboratoriýa stoly arassalanmalydyr we RNase-iň ornaşmagy sebäpli RNK zaýalanmagynyň öňüni almak üçin synag wagtynda bir gezek ulanylýan ellikler we maskalar geýilmelidir.
4. Reagent ulanylanda RNase bilen hapalanýar.
Teklip: Baglanyşykly synaglar üçin ösümlikleriň umumy RNK çykarmak toplumlarynyň täze tapgyryny çalyşyň.
5. RNK manipulýasiýasy üçin ulanylýan sentrifuga turbalary we turbalar maslahatlary RNase bilen hapalanýar.
Teklip: RNK çykarmakda ulanylýan sentrifuga turbalarynyň, turbalaryň maslahatlarynyň, turbalarynyň we ş.m.-leriň hemmesiniň RNase-ýokdugyna göz ýetiriň.
Gollanma gollanmalary:
Ösümlikleriň jemi RNA izolýasiýa toplumynyň goşmaça gollanmasy
