Iýmitdäki mikroblaryň çalt nuklein kislotasyny çykarmak toplumy
Kitiň beýany:
PişikTK101
Bu toplum, çykarylmazdan we arassalanmazdan ýönekeý we amatly we nuklein kislotasyny güýçlendirmek üçin gönüden-göni ulanylyp bilinjek özboluşly çözgüt ulgamyny kabul edýär.
Düşündirişler
Bu toplum, çykarylmazdan we arassalanmazdan ýönekeý we amatly we nuklein kislotasyny güýçlendirmek üçin gönüden-göni ulanylyp bilinjek özboluşly çözgüt ulgamyny kabul edýär.
Kitiň mazmuny
| Ady | Kompostiýa | Spesifikasiýa |
| Nuklein kislotasynyň çykaryjy serişdesi | Lizate | 6mL |
Garaşylýan ulanyş
Iýmitden mikroblary çalt nuklein kislotasy çykarmak üçin ulanylýar.
Saklamagyň şertleri we möhleti
Otag otagynda 12 aý saklaň.
Gurallar we sarp edilýän zatlar
Suw wannasy ýa-da metal hammam, ýokary tizlikli sentrifuga (deslapky bejergi üçin ulanylýar), turbalar we maslahatlar.
Ulanylyşy
1.MysalPre-bejergisi
Nusga serediň GB4789 ýa-da beýleki pudak standartlaryna serediň.
2．Nuke kislotasyny çykarmak
Lizat turbasyndaky 20 baýlaşdyryjy ergini, worteks 30 sekunt alyň, gysga wagtda sentrifugany alyň we bir gapdalda goýuň.
Bellik: Lizatdan nuklein kislotasyny çykarmak 10 minudyň içinde tamamlanmalydyr we uzak wagtlap saklanyp bilinmez.
【Notice】
1. Synag wagtynda arassa iş eşiklerini we ellikleri geýmek maslahat berilýär.Ulanylan maslahatlar öňünden sterilizasiýa edilmelidir we synagda emele gelen galyndylaryň hemmesi wagtynda taşlanmalydyr.
2. Amal ädimlerini berk berjaý etmegiňizi haýyş edýäris.
3. Kitabyň hereket ediş möhletiniň dowamynda ulanyň.
Meseleleriň derňewi üçin gollanmalar
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Hiç bir RNK çykaryp bolmaýar ýa-da nuklein kislotasynyň hasyllylygy pes
Adatça dikeldiş netijeliligine täsir edýän köp faktor bar, mysal üçin: RNK mazmuny, iş usuly, elýusiýa göwrümi we ş.m.
Umumy sebäpleriň derňewi ：
1. Işleýän wagtyňyz hammam ýa-da pes temperatura (4 ° C) merkezden gaçyryş.
Teklip: Otagyň temperaturasy (15-25 ° C), hiç haçan buz wannasy we pes temperatura sentrifugasy.
2. Nädogry nusga saklanyşy ýa-da nusga saklanyşy gaty uzak.
Teklip: Nusgalary -80 ° C derejesinde saklaň ýa-da suwuk azotda doňduryň we doňdurmagyň gaýtadan ulanylmagyndan gaça duruň;RNK çykarmak üçin täze ýygnanan nusgalary ulanmaga synanyşyň.
3. ampleterlik nusga lizisi
Teklip: Nusga bilen iş ergininiň (Çyzykly akrilamid) gowy garylyp, otag temperaturasynda (15-25 ° C) 10 minut inkubasiýa edilendigine göz ýetiriň.
4.Eluent nädogry goşuldy
Teklip: Arassalaýyş sütüniniň membranasynyň ortasyna RNase-Free ddH2O goşulandygyna göz ýetiriň.
5. Buffer viRW2-de suwuk etanyň nädogry göwrümi
Teklip: Görkezmelere eýeriň, Buffer viRW2-e suwuk etanolyň dogry mukdaryny goşuň we toplumy ulanmazdan ozal gowy garmaly。
6. Nädogry nusga ulanylyşy.
Teklip: Buffer viRL-den 500μl üçin 200µl nusga.Artykmaç nusga göwrümi RNK çykarmagyň peselmegine getirer.
7. Nädogry elitasiýa göwrümi ýa-da doly däl elitasiýa.
Teklip: Arassalaýyş sütüniniň uzynlygy 30-50μl;elitasiýa effekti kanagatlanarly däl bolsa, öňünden gyzdyrylan RNase-Free ddH goşmak maslahat berilýär2O we otag temperaturasynda 5-10min ýaly wagt goýuň
8.Purifikasiýa sütüninde Buffer viRW2-de ýuwlandan soň etanol galyndysy bar.
Teklip: Bufer viRW2-de ýuwlandan we 2 minut boş turba merkezden gaçyryşdan soň etanol galan bolsa, arassalanan sütün galan etany doly aýyrmak üçin boş turba merkezden gaçyryşdan soň 5 minut otag temperaturasynda galdyrylyp bilner.
Arassalanan RNK molekulalarynyň zaýalanmagy
Arassalanan RNK-nyň hili, nusga saklamak, RNase hapalanmagy we işleýşi ýaly faktorlar bilen baglanyşykly.
Umumy sebäpleriň derňewi ：
1. Theygnalan nusgalar wagtynda saklanmady.
Teklip: Eger nusga ýygnanandan soň ulanylmasa, derrew -80 at ýa-da suwuk azotda saklaň.RNK molekulalaryny çykarmak üçin mümkin boldugyça täze ýygnanan nusgalary ulanmaga synanyşyň.
2.Ygnanan nusgalar doňup, ereýärdi.
Teklip: Nusga ýygnamak we saklamak wagtynda gaýta-gaýta doňdurmakdan we eremekden gaça duruň (ýogsam nuklein kislotasynyň hasyly azalýar).
3.RNase operasiýa otagynda girizildi ýa-da bir gezek ulanylýan ellikler, maskalar we ş.m.
Teklip: RNK molekulalarynyň synagyny çykarmak aýratyn RNK operasiýa otagynda iň oňat ýerine ýetirilýär we tejribe tablisasy synagdan öň arassalanýar.Synag wagtynda bir gezek ulanylýan ellikleri we maskalary geýiň, RNase girizilmegi netijesinde ýüze çykýan RNK zaýalanmazlygy üçin.
4. Reagent ulanylanda RNase bilen hapalanýar.
Teklip: Baglanyşykly synaglar üçin täze Wirus RNK izolýasiýa toplumyny çalyşyň.
5. Merkezden gaçyryş turbalarynyň, turbageçirijileriň we ş.m. RNase hapalanmagy Teklip: Merkezden gaçyryş turbalarynyň, turbalaryň uçlarynyň we turbalarynyň hemmesiniň RNase-ýokdugyna göz ýetiriň.
Arassalanan RNK molekulalary aşaky synaglara täsir etdi
Arassalaýyş sütüni bilen arassalanan RNK molekulalary, duz ionlary ýa-da beloklar gaty köp bolsa, aşakdaky synaglara täsir eder, meselem: ters transkripsiýa, Demirgazyk Blot we ş.m.
1.Saýlanan RNK molekulalarynda duz ionlary bar.
Teklip: Buffer viRW2-e dogry suwly etanolyň goşulandygyna göz ýetiriň we arassalaýyş sütünini iş görkezmelerinde dogry sentrifugasiýa tizligine görä iki gezek ýuwuň still Duz ionlary galan bolsa, arassalaýyş sütünine Buffer viRW2 goşup, otag temperaturasynda 5 minut goýup bilersiňiz.Soňra duz ionlarynyň hapalanmagyny iň ýokary derejede aýyrmak üçin merkezden gaçyryş işini ýerine ýetiriň
2.Saýlanan RNK molekulalarynda galan etanol bar
Teklip: arassalaýjy sütünleriň Buffer viRW2 tarapyndan ýuwlandygyny tassyklandan soň, iş görkezmelerinde merkezden gaçyryş tizligine laýyklykda boş turba merkezden gaçyryş işini ýerine ýetiriň.Etanol galan bolsa, galan etanoly iň ýokary derejede aýyrmak üçin boş turba merkezden gaçyryşdan soň otag temperaturasynda 5 minut goýup bolýar.
Gollanma gollanmalary:
Wirus RNK izolýasiýa toplumynyň görkezmesi
