Ösümlik DNK izolýasiýa toplumy Genomiki ösümlik DNK arassalaýyş toplumlary reagent protokoly
Aýratynlyklary
50 Taýýarlyk, 100 Taýýarlyk, 250 Taýýarlyk
Bu toplumda DNK-ny, Foregene proteazyny we ösümlik genom DNK-nyň arassalanmagyny ep-esli aňsatlaşdyrýan özboluşly bufer ulgamyny baglanyşdyryp biljek diňe DNK sütüni ulanylýar.Genomiki DNK-nyň zaýalanmagynyň öňüni alýan 30 minutyň içinde ýokary hilli genom DNK alyp bolýar.
Aýlaw sütüninde ulanylýan diňe DNK kremniy gel membranasy, Foregene-iň DNK bilen täsirli we aýratyn baglanyşyp bilýän we RNK, hapa beloklar, ionlar, polisakaridler, polifenollar we beýleki organiki birleşmeleri ýok edip biljek täsin täze materialdyr.
Önüm bölekleri
| Bufer PL1, Bufer PL2 |
| Bufer PW, Bufer WB, Bufer EB |
| Foregene proteaz |
| Diňe DNK sütüni |
| Görkezmeler |
Aýratynlyklary we artykmaçlyklary
RN RNase hapalanmasy ýok: Kitap bilen üpjün edilen diňe DNK sütüni, synag wagtynda goşmaça RNase bolmazdan RNK-ny genom DNK-dan çykarmaga mümkinçilik berýär, laboratoriýanyň ekzogen RNase bilen hapalanmagynyň öňüni alýar.
■ Çalt tizlik: Foregene Protease meňzeş proteizlerden has ýokary işjeňlige eýe bolup, dokumanyň nusgalaryny has çalt siňdirýär.
■ pleönekeý: genom DNK çykarmak işi 30 minutda tamamlanyp bilner.
Amatly: Merkezden gaçyryş otag temperaturasynda amala aşyrylýar, 4 ℃ pes temperatura merkezden gaçyryş ýa-da DNK-nyň etanol ýagmagy talap edilmeýär.
■ Howpsuzlyk: hiç hili organiki reagent talap edilmeýär.
■ qualityokary hilli: Arassalanan genom DNK-da uly bölekler bar, RNK ýok, RNase ýok we gaty pes ion düzümi dürli synaglaryň talaplaryny kanagatlandyryp bilmeýär.
Kit toplumy
Genom DNK-ny täze ýa-da doňan ösümlik dokumalaryndan çykarmak we arassalamak üçin amatly.
Iş akymy
Diagramma
Saklamak we ýaramlylyk möhleti
Kitap 12 aý otag temperaturasynda (15–25 ℃) we has uzak wagtlap 2–8 can saklanyp bilner.
Foregene Protease Plus ergininiň, uzak wagtlap (3 aý) otag temperaturasynda saklananda işjeň bolan özboluşly formulasy bar;saklanylanda işjeňligi we durnuklylygy has gowy bolar4 ℃, şonuň üçin ony 4 at-da saklamak maslahat berilýär, -20 at-da saklamazlygy ýatdan çykarmaň.
Mesele derňew gollanmasy
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Pes hasyl ýa-da DNK ýok
Adatça genom DNK-nyň öndürijiligine täsir edýän köp faktor bar, şol sanda nusganyň çeşmesi, nusganyň ýaşy, nusganyň saklanyş şertleri we işleýşi.
Gazyp almak wagtynda genom DNK alyp bolmaýar
1. Dokumanyň nusgalary nädogry saklanýar ýa-da gaty uzak saklanýar, netijede genom DNK-nyň zaýalanmagyna sebäp bolýar.
Teklip: Dokuma nusgalaryny suwuk azotda ýa-da -20-de saklaň°C;genom DNK çykarmak üçin täze ýygnanan nusgalary ulanmaga synanyşyň.
2. Nusga mukdary gaty az bolsa, degişli genom DNK-nyň alynmazlygyna sebäp bolup biler.
Teklip: Uzak wagtlap saklanan ýa-da genomyň DNK zaýalanmagy bilen dokuma nusgalary üçin ep-esli genom DNK çykarmak üçin dokuma nusgalarynyň mukdary degişli derejede artdyrylyp bilner.Nusganyň mukdary DNK zerurlyklaryna görä kesgitlenip bilner, ýöne täze nusga 100mg-den, gury nusga 30mg-dan geçmeli däldir.
3. Nusga suwuk azot bilen däl ýa-da suwuk azotdan soň uzak wagtlap ýerleşdirilmeýär.
Teklip: DNK çykarylanda, öýjük diwaryny döwmek üçin nusga suwuk azot bilen doly bolmaly;üweýişden soň, nusga poroşokyny 65-de gyzdyrylan PL1-e geçirmegiňizi haýyş edýäris°C mümkin boldugyça gysga wagtda (ýer tozy eränsoň, genom DNK çalt zaýalanyp başlar).
4. Foregene Protease-yň nädogry saklanmagy, işjeňligiň peselmegine ýa-da hereketsiz bolmagyna getirýär.
Teklip: “Foregene Protease” -niň saklanyş şertlerini tassyklaň ýa-da ferment gidrolizi üçin täze “Foregene Protease” bilen çalşyň.
5. Kitap nädogry saklanýar ýa-da gaty uzak saklanýar, bu toplumdaky käbir komponentleriň işlemezligine sebäp bolýar.
Teklip: Baglanyşyk amallary üçin täze ösümlik genom DNK çykarmak toplumyny satyn alyň.
6. Kitabyň nädogry ulanylmagy.
Teklip: Ösümlikleriň genom DNK-syny çykarmak we arassalamak üçin nusgalara bagyşlanan ösümlik DNK izolýasiýa toplumyny satyn alyň.
7. Bufer WB asuwsuz etanol.
Teklip: Buffer WB-e mutlak etanolyň dogry mukdaryny goşuň.
8. Eluent kremniniň membranasyna dogry atylmady.
Teklip: 65-de öňünden gyzdyrylan eluenti goşuň℃silisiýa jel membranasynyň ortasyna aşak düşüp, elitasiýa netijeliligini ýokarlandyrmak üçin 5 minut otag temperaturasynda goýuň.
Pes öndürijilikli genom DNK almak üçin gazyp almak
1. Nusga nädogry saklanýar ýa-da gaty uzak saklanýar, netijede genom DNK-nyň zaýalanmagyna sebäp bolýar.
Teklip: Dokuma nusgalaryny -20-de saklaň℃;genom DNK çykarmak üçin täze ýygnanan dokuma nusgalaryny ulanmaga synanyşyň.
2. Dokuma nusgalarynyň mukdary gaty az bolsa, çykarylan genom DNK az bolar.
Teklip: Käbir ösümlik nusgalary suwotulara, suwotulara we ş.m. ýaly suwlara baý, dozasy ýerlikli ýokarlandyrylyp ýa-da amaldan biraz öň suwsuzlandyrylyp bilner.
3. Nusgalar suwuk azot bilen düýpli ýerleşdirilmedi ýa-da üwürilenden soň otag temperaturasynda uzak saklandy.
Teklip: Suwuk azot üwemek ýeterlik bolmaly we öýjük diwaryny mümkin boldugyça döwmeli;üweýişden soň derrew nusga tozy 65-e geçirmeli℃indiki ädim üçin gyzdyrylan Buffer PL1.
4. Dogry toplumy ulanmazlyk.
Teklip: Ösümlikleriň genom DNK-syny çykarmak we arassalamak üçin ýörite ösümlik DNK izolýasiýa toplumyny ulanyň.
5. “Foregene Protease” -niň nädogry saklanmagy, işjeňligiň peselmegine ýa-da hereketsiz bolmagyna getirýär.
Teklip: “Foregene Protease” -niň saklanyş şertlerini tassyklaň ýa-da ferment gidrolizi üçin täze “Foregene Protease” bilen çalşyň.
6. Möhüm mesele
Teklip: Bufer EB-ni elitasiýa üçin ulanyň;ddH ulanýan bolsa2O ýa-da beýleki elýentler, eluentiň pH-iň 7.0-8.5 aralygyndadygyna göz ýetiriň.
7. Eluent dogry damdyrylmaýar
Teklip: Elitasiýa damjasyny kremniniň membranasynyň ortasyna goşuň we elitasiýa netijeliligini ýokarlandyrmak üçin otag temperaturasynda 5 minut goýuň.
8. Düşnükli ses gaty az
Teklip: Görkezmelere laýyklykda genom DNK ýok etmek üçin eluenti azyndan 100-den az bolmaly däldirμl.
Pes arassalygy bilen çykarylan genom DNK
Genomiki DNK-nyň pes arassalygy, aşaky synaglaryň şowsuzlygyna ýa-da pes täsirine getirer, meselem: ferment kesilip bilinmez we maksatly gen bölegi PCR tarapyndan alynmaz.
1. Dürli beloklaryň hapalanmagy, RNK hapalanmagy.
Derňew: Bufer PW sütüni ýuwmak üçin ulanylmady;Bufer PW sütüni dogry merkezden gaçyryş tizliginde ýuwmak üçin ulanylmady.
Teklip: adatdan daşary tebigatyň sütünden geçende, adatdan daşary tebigatda ýagyşyň ýokdugyna göz ýetiriň;arassalaýyş sütünini görkezmelere laýyklykda Buffer PW bilen ýuwmagy unutmaň we bu ädimden aýrylyp bolmaz.
2. Haramlyk ionynyň hapalanmagy.
Derňew: Bufer WB ýuwmak sütüni aýryldy ýa-da diňe bir gezek ýuwuldy, netijede galyndy ion hapalanmagyna sebäp boldy.
Teklip: Galyndy ionlaryny mümkin boldugyça aýyrmak boýunça görkezmelere laýyklykda Buffer WB bilen iki gezek ýuwuň.
3. RNase hapalanmagy.
Derňew: Bufere ekzogen RNase goşulýar;Buffer PW-de nädogry ýuwulmagy, galyndy RNase sebäp bolar we in vitro transkripsiýasy ýaly aşaky RNK synag amallaryna täsir eder.
Teklip: Foregene seriýaly nuklein kislotasyny çykarmak toplumlary goşmaça RNase bolmazdan RNK-ny aýryp biler we ösümlik DNK izolýasiýa toplumyndaky ähli reagentlere RNase gerek däl;arassalaýyş sütünini görkezmelere laýyklykda Buffer PW bilen ýuwmagy unutmaň we bu ädimden aýrylyp bolmaz.
4. Etanol galyndylary.
Derňew: Arassalaýyş sütünini Buffer WB bilen ýuwandan soň, boş turba merkezden gaçyryş işleri geçirilmedi.
Teklip: Dogry boş turba merkezden gaçyryş görkezmelerine eýeriň.
Gollanma:
Ösümlik DNK izolýasiýa toplumynyň görkezmesi
