Buccal Swab / FTA Card DNK izolýasiýa toplumy Genomiki DNK çykarmak ýa-da Buccal Swabs-dan arassalaýyş toplumy
Kitiň beýany:
Bukal swab / FTA Card nusgalaryndan ýokary hilli genom DNK-ny çalt arassalaň.
◮RNase hapalanmasy ýok:Kitap bilen üpjün edilen diňe DNK sütüni, synag wagtynda RNase goşmazdan, RNK-ny genom DNK-dan aýyrmaga mümkinçilik berýär, laboratoriýanyň ekzogen RNase bilen hapalanmagynyň öňüni alýar.
◮Çalt tizlik:“Foregene Protease” şuňa meňzeş proteizlerden has ýokary işjeňlige eýe bolup, dokumanyň nusgalaryny çalt siňdirýär;amal ýönekeý we genom DNK çykarmak amaly 20-80 minudyň içinde tamamlanyp bilner.
◮Amatly:Merkezden gaçyryş otag temperaturasynda amala aşyrylýar we 4 ° C pes temperaturaly sentrifugasiýa ýa-da DNK-nyň etanol ýagyşyna zerurlyk ýok.
◮Howpsuzlyk:Hiç hili organiki reagent çykarmak talap edilmeýär.
◮Qualityokary hilli:Çykarylan genom DNK-da uly synaglar, RNK ýok, RNase ýok we dürli synaglaryň talaplaryna laýyk bolup bilýän gaty pes ion düzümi bar.
◮Mikro elitasiýa ulgamy:Aşak akymlary kesgitlemek ýa-da synag etmek üçin amatly genom DNK-nyň konsentrasiýasyny artdyryp biler.
Düşündiriş
Bu toplum, bukal çişlerinden we FTA kartasyndan (gan tegmillerinden) ýokary konsentrasiýaly genom DNK-ny almak üçin täsirli we çalt usul bilen üpjün edýär.Kompaniýamyzy ulanmak'Diňe özboluşly DNK-dan diňe kremniniň membranasynyň aýlaw sütüni we formulasy, Foregene Protease, ýokary konsentrasiýaly, ýokary hilli genom DNK-ny 80 minutda çykaryp bolýar.Designedörite işlenip düzülen kiçi arassalaýyş sütüni genom DNK-ny baglanyşdyrýar we DNK az mukdarda çykarylyp bilner (15μl) aşaky geni kesgitlemek ýa-da synag etmek üçin amatly alnan genom DNK-nyň konsentrasiýasyny ýokarlandyrmak üçin elýusiýa ulgamy.Toplum bir gezekde bir ýa-da birnäçe nusgany gaýtadan işläp biler we arassalamak prosesi fenol, hloroform we köp wagt talap edýän izopropanol ýa-da etanol ýagyşy ýaly organiki maddalary çykarmagy talap etmeýär we amal ýönekeý we wagt tygşytlaýar.
Aýratynlyklary
50 Taýýarlyk
Kit komponentleri
| Bufer ST1 |
| Bufer ST2 |
| Çyzykly akrilamid |
| Bufer PW |
| Bufer WB |
| Bufer EB |
| Foregene proteaz |
| Diňe DNK sütüni |
| Görkezmeler |
Aýratynlyklary we artykmaçlyklary
- RNase hapalanmasy ýok: Kitap bilen üpjün edilen diňe DNK sütüni, synag wagtynda RNase goşmazdan, RNK-ny genom DNK-dan aýyrmaga mümkinçilik berýär, laboratoriýanyň ekzogen RNase bilen hapalanmagynyň öňüni alýar.
- Çalt tizlik: Foregene Protease şuňa meňzeş proteizlerden has ýokary işjeňlige eýe, nusgalary çalt siňdirýär;ýönekeý işlemek.
- Amatly: Merkezden gaçyryş otag temperaturasynda amala aşyrylýar, 4 ° C pes temperaturaly merkezden gaçyryş ýa-da DNK-nyň etanol ýagmagy zerurlygy ýok.
-Howpsuzlyk: Hiç hili organiki reagent çykarmak hökman däl.
-Hokary hili: Çykarylan genom DNK-da uly synaglar bar, RNK ýok, RNase ýok we dürli synaglaryň talaplaryna laýyk bolup bilýän gaty pes ion düzümi bar.
-Mikro-elitasiýa ulgamy: Aşakdaky akymlary ýüze çykarmak ýa-da synag etmek üçin amatly genom DNK-nyň konsentrasiýasyny artdyryp biler.
Kit toplumy
Genomiki DNK-ny aşakdaky nusgalardan arassalamak üçin amatlydyr: bukal swab, FTA Card (gan tegmilleri).
Saklamak we ýaramlylyk möhleti
-Bu toplumy gurak şertlerde otag temperaturasynda (15-25 ° C) 12 aýlap saklap bolýar;has uzak wagtlap saklamaly bolsa, 2-8 ° C derejesinde saklanyp bilner.
Bellik: Pes temperaturada saklansa, ergin ýagyşa ýykgyn edýär.Ulanylmazdan ozal, çözgüdi belli bir wagtlap otag temperaturasynda goýuň.Zerur bolsa, çökgünligi eritmek üçin 37 ° C suw wannasynda 10 minut gyzdyryň we ulanmazdan ozal garmaly.
-Foregene proteaz ergininiň, uzak wagtlap (3 aý) otag temperaturasynda saklananda özboluşly formulasy bar;işjeňligi we durnuklylygy 4 ° C-de saklananda has gowy bolar, şonuň üçin ony 4 ° C-de saklamak maslahat berilýär, -20 ° C-de saklamazlygy ýatdan çykarmaň.
Arassalaýyş sütüni ýapyk
Bu toplumda, genom DNK çykarmak işinde arassalaýyş sütüni merkezden gaçyryş ädimleri bolmazdan ferment liz garyndysyna gönüden-göni ýerleşdirilýär we doly däl fermentleşme we nusganyň ýokary ýapyklygy sebäpli arassalaýyş sütüni ýapylyp bilner.
Mümkin bolup biljek sebäpler aşakdakylar:
1. Dokuma nusgalarynyň doly däl ferment siňdirişi.
Teklip: “Foregene Protease” -niň gaýtadan işleniş wagty degişli uzaldylyp bilner ýa-da adatdan daşary tebigat 12 000 aýlawda (~ 13,400 × g) 5 minutda sentrifugadan soň kabul edilip bilner.
2. Dokuma nusgalaryny ýa-da uly dokumalary aşa köp ulanmak.
Teklip: Iň gowusy, nusgadaky 1 Buccal swab-dan geçmeli däl;nusga gaty uly bolsa, degişlilikde Buffer ST1, Foregene Protease, bufer ST2 dozasyny köpeldiň.
3. Mysal üçin ýelimlilik gaty ýokary.
Teklip: Genomiki DNK çykarmazdan ozal, 10 mM Tris-HCl bilen nusgalary ýerlikli suwuklandyryp bolýar.
4. Gan kartasynyň bölekleri soruldy.
Teklip: Gan nokadynyň (FTA Card) genom çykarylyşynyň 6-njy ädiminiň wagtlaýyn merkezden gaçyryş wagty degişli uzaldylyp bilner.
Pes hasyl ýa-da DNK ýok
Genomiki DNK öndürijiligine täsir edýän dürli faktorlar bar, mysal üçin gelip çykyşy, nusga saklanyş şertleri, nusga taýýarlamak, manipulýasiýa we ş.m.
Gazyp almak wagtynda genom DNK alyp bolmaýar
Mümkin sebäpler aşakdakylar:
1. Nusgalary nädogry saklamak ýa-da gaty uzak saklamak genom DNK-nyň zaýalanmagyna getirýär.
Teklip: Agyz boşluklary has gowusy täze nusga almalydyr we genom DNK çykarmak amallary üçin konserwirlenen çişleri ulanmak maslahat berilmeýär;ganyň menek nusgalary hiliň ýokarydygyny we saklanyş wagtynyň gaty uzyn bolmaly däldigini üpjün etmeli.
2. Dokumanyň gaty az ulanylmagy degişli genom DNK-nyň çykarylmagyna sebäp bolup bilmez.
Teklip: operasiýa gollanmasyndaky bukal swab nusga alma görkezmelerine eýeriň we genom DNK çykarmak üçin agyz boşlugyna ýeterlik öýjük birikdirilmegi üçin mümkin boldugyça köp süpüriň;Gan tegmilleriniň nusgasyny almak üçin, ganyň tegmillerini kesýän ýerleri degişli derejede köpeldip bolar.
3. Foregene proteaz nädogry saklanýar, netijede işjeňliginiň peselmegine ýa-da hereketsiz bolmagyna sebäp bolýar.
Teklip: “Foregene Protease” -niň saklanyş şertlerini tassyklaň ýa-da ferment reaksiýasy üçin täze “Foregene Protease” bilen çalşyň.
4. Kitabyň nädogry saklanmagy ýa-da saklanyş wagty gaty uzyn, bu toplumdaky käbir komponentleriň näsazlygyna sebäp bolýar.
Teklip: Degişli amallar üçin täze “Buccal swab” DNK izolýasiýa toplumyny satyn alyň.
5. Bufer WB mutlak etanol goşmaýar.
Teklip: WB buferiniň mutlak etanolyň dogry göwrümini goşýandygyny tassyklaň.
6. Silikon filmine eluent dogry goşulmaýar.
Teklip: Silikon membrananyň ortasyna 65 ° C öňünden gyzdyrylan eluent damjalaryny goşuň we elitasiýa netijeliligini ýokarlandyrmak üçin otag temperaturasynda 5 minut goýuň.
Pes öndürijilikli genom DNK izolýasiýa edildi
Mümkin bolup biljek sebäpler aşakdakylar:
1. Nusgalary nädogry saklamak ýa-da gaty uzak saklamak genom DNK-nyň zaýalanmagyna getirýär.
Teklip: Agyz boşluklary has gowusy täze nusga alnan we genom DNK çykarmak üçin saklanylýan çişler ulanylmaly däldir.
2. Dokuma nusgasynyň mukdary gaty az bolsa, çykarylan genom DNK düzümi az bolar.
Teklip: Genomiki DNK çykarmak üçin agyz boşlugyna ýeterlik öýjük birikdirilip bilner ýaly, iş gollanmasyndaky agyz süpürgiçiniň nusgalaryny ýerine ýetiriň.
3. Foregene proteaz nädogry saklanýar, netijede işjeňliginiň peselmegine ýa-da hereketsiz bolmagyna sebäp bolýar.
Teklip: “Foregene Protease” -niň saklanyş şertlerini tassyklaň ýa-da ferment reaksiýasy üçin täze “Foregene Protease” bilen çalşyň.
4. Düşnükli meseleler.
Teklip: Bufer EB-ni elitasiýa üçin ulanyň;ddH ulanýan bolsa2O ýa-da beýleki elýentler, eliň pH-siniň 7.0-8.5 aralygyndadygyny tassyklaň.
5. Eluate aşaklygyna dogry goşulmaýar.
Teklip: Silikon membrananyň ortasyna elli damjalary goşuň we elitasiýa netijeliligini ýokarlandyrmak üçin otag temperaturasynda 5 minut goýuň.
6. Elýusiýa suwuklygy gaty az ýygnanýar.
Teklip: Genomiki DNK-ny görkezmelerde talap edilişi ýaly iň azyndan 15 μl-dan az bolmaly.
Genomiki DNK-nyň pes arassalygy
Genomiki DNK arassalygy pes akym synaglarynyň şowsuzlygyna ýa-da kanagatlanarly netijelerine sebäp bolup biler, meselem: fermentleri kesip bolmaz, PCR gyzyklanmanyň gen bölegini alyp bilmez we ş.m.
Mümkin sebäpler aşakdakylar:
1. Geteroproteiniň hapalanmagy, RNK-nyň hapalanmagy.
Derňew: Arassalaýyş sütüni Buffer PW ulanyp ýuwulmady;bufer PW ýuwujy arassalaýyş sütüni merkezden gaçyryş tizligini ulanyp ýuwulmady.
Teklip: Etanol goşmazdan ozal adatdan daşary tebigatda ýagyşyň ýokdugyna göz ýetiriň;arassalama sütünini görkezmelere görä ýuwmagy unutmaň, bu ädimden aýrylyp bolmaz.
2. Haramlyk ionynyň hapalanmagy.
Derňew: Bufer WB ýuwujy arassalaýjy sütün diňe bir gezek aýryldy ýa-da ýuwuldy, netijede galyndy ion hapalanýar.
Teklip: Galyndy ionlaryny mümkin boldugyça aýyrmak üçin Buffer WB-ni 2 gezek ýuwuň.
3. RNK fermentleriniň hapalanmagy.
Derňew: Buferde daşary ýurt RNases goşuldy;Bufer PW ýuwmak amaly nädogrydy, netijede RNase galyndylary, vitro transkripsiýasy ýaly aşaky RNK synag amallaryna täsir etdi.
Teklip: Foregene seriýaly nuklein kislotasynyň izolýasiýa toplumlary RNase goşmaça goşulmazdan RNK-ny aýryp biler, şonuň üçin bukal Swab / FTA Card DNA izolýasiýa toplumy RNase goşmaly däldir;Buffer PW ýuwujy arassalaýyş sütüni üçin görkezmeleri ýerine ýetiriň, bu ädimden aýrylyp bolmaz.
4. Etanol galyndysy.
Derňew: Bufer WB arassalaýyş sütünini ýuwandan soň boş turba merkezden gaçyryş işini ýerine ýetirmedi.
Teklip: görkezmelere laýyklykda dogry boş turba merkezden gaçyryş amalyny ýerine ýetiriň.
5. Hapalygyň beýleki hapalanmagy.
Derňew: Saklanan nusgalar ýa-da ýörite nusgalar öňünden taýýarlanmaýar.
Teklip: Görkezilişi ýaly nusgany düýpli gözden geçiriň.
