Eşidiş ukyby (HL) adamlarda iň köp ýaýran duýgur maýyplyk keselidir.Ösen ýurtlarda çagalarda ker keseliniň 80% töweregi genetiki faktorlar sebäpli ýüze çykýar.Iň ýaýranlary bir genli kemçiliklerdir (1-nji suratda görkezilişi ýaly), 124 gen mutasiýa adamlarda eşidiş eşidişiniň ýitmegi bilen baglanyşykly, galanlary daşky gurşaw faktorlary sebäpli ýüze çykýar.Kokleir implantasy (eşidiş nerwine göni elektrik stimulyny üpjün edýän içki gulakda ýerleşdirilen elektron enjam) agyr HL-ni bejermek üçin iň täsirli warianty, eşidiş enjamy (ses tolkunlaryny öwürýän we güýçlendirýän daşarky elektron enjam) orta HL hassalaryna kömek edip biler.Şeýle-de bolsa, häzirki wagtda nesil yzarlaýan HL (GHL) -ni bejermek üçin derman ýok.Soňky ýyllarda gen bejergisi içki gulagyň işlemezligini bejermek üçin geljegi uly çemeleşme hökmünde has köp ünsi çekdi.

1-nji surat.Karlyk bilen baglanyşykly üýtgeýiş görnüşiniň paýlanyşy. [1]

Recentlyakynda Salk institutynyň we Şeffild uniwersitetiniň alymlary molekulýar terapiýa - usullar we kliniki ösüş [2] atly gözleg netijesini neşir etdiler, bu nesil keriniň wivo gen terapiýasy üçin giň amaly mümkinçilikleri görkezdi.Salk institutynyň gözleg boýunça kömekçisi we Waitt ösen biofotonika merkeziniň müdiri Uri Manor, eşidişiniň agyrlygy bilen doglandygyny we eşidişiň dikeldilmeginiň ajaýyp sowgat boljakdygyny duýdy.Öňki gözleginde, Eps8-iň aktin bilen baglaýjy we ýapmak işjeňligi bolan aktin kadalaşdyryjy belokdygy anyklandy;saçly öýjüklerde, MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 we GNAI3 bilen Eps8 tarapyndan emele gelen belok toplumy, esasan, MYO15A bilen bilelikde BAIAP2L2-ni gysga stereosiliýanyň uçlarynda lokallaşdyrýan uzyn stereosiliýanyň uçlary bar.Şonuň üçin Eps8 adaty eşidiş funksiýasy üçin zerur bolan saç öýjükleriniň stereosiliýasynyň uzynlygyny sazlap biler;Eps8-iň ýok edilmegi ýa-da mutasiýa, gysga stereosiliýa sebäp bolar, bu bolsa sesiň beýnini duýmak üçin elektrik signallaryna dogry öwrüp bilmez, bu bolsa kerlige sebäp bolar..Şol bir wagtyň özünde, Şeffild uniwersitetiniň professory Walter Markotti, Eps8 ýok mahaly saç öýjükleriniň kadaly ösüp bilmejekdigini ýüze çykardy.Bu gözlegde, Manor we Markotti birleşip, stereosiliar öýjüklere Eps8 goşmagyň olaryň işini dikeldip biljekdigini we öz gezeginde syçanlarda eşidişini gowulaşdyryp biljekdigini anykladylar.Gözleg topary adeno bilen baglanyşykly wirus (AAV) wektor Anc80L65 ulanyp, ýabany görnüşli EPS8 öz içine alýan kodlaşdyrma yzygiderliligini Eps8 - / - täze doglan P1-P2 syçanjygy tegelek penjire membranasynyň sanjymy bilen üpjün etdi;Syçanyň kokleir saç öýjüklerinde stereosiliýanyň funksiýasy ýetişmänkä abatlandy;abatlaýyş täsiri şekillendiriş tehnologiýasy we stereosiliýany ölçemek bilen häsiýetlendirildi.Netijeler Eps8-iň stereosiliýanyň uzynlygyny ýokarlandyrandygyny we pes ýygylykly öýjüklerde saç öýjükleriniň işini dikeldendigini görkezdi.Şeýle hem, wagtyň geçmegi bilen öýjükleriň bu gen terapiýasy bilen halas bolmak ukybyny ýitirýän ýalydygyna göz ýetirdiler.Munuň manysy, bu bejerginiň utero görnüşinde berilmegi zerur bolup biler, sebäbi Eps8 - / - saç öýjükleri syçanlar dünýä inenden soň abatlanylmazdan ýa-da zeper ýetip biler.Manor: "Eps8 köp dürli funksiýaly belok, entek öwrenilmeli köp zat bar" -diýdi.Geljekki gözlegler, dürli ösüş etaplarynda eşidişiň dikeldilmegine Eps8 gen terapiýasynyň täsirini we bejerginiň mümkinçiliklerini uzaltmagyň mümkindigini ýa-da ýokdugyny öwrenmegi öz içine alar.Bilgeşleýin, 2020-nji ýylyň noýabr aýynda Ysraýylyň Tel Awiw uniwersitetiniň professory KarenB Awraham EMBO Molekulýar Medisina [3] inurnalynda AAV9-PHP zyýansyz sintetiki adeno bilen baglanyşykly wirus döretmek üçin innowasion gen terapiýa tehnologiýasyny ulanyp, netijelerini çap etdi.B, Syne4 - / - syçanlaryň saç öýjüklerindäki gen kemçiligi, Syne4 kodlaşdyrma yzygiderliligini syçanlaryň içki gulagyna sanjym edip, saç öýjüklerine girmäge we genetiki materialy goýbermäge mümkinçilik berdi (2-nji suratdaky ýaly).

2-nji surat.Içki gulak anatomiýasynyň shematiki şekillendirilmegi, Kortiniň organiýasyna we nesprin-4 öýjük funksiýasyna ünsi jemleýär.

Gen terapiýasynyň nesil kesellerini gen derejesinde bejermek maksadyna ýetmek üçin islendik mutasiýa edilen genleri bejermek (ýagny keseliň genetiki üýtgemelerine gözegçilik etmek) arkaly girizmek, ýokary kliniki täsire eýe bolandygyny görmek bolýar.ýüz tutmagyň geljegi.Genetiki taýdan ýetmezçilik edýän ker üçin häzirki gen bejeriş usullaryny aşakdaky kategoriýalara bölmek bolar:

gen çalyşmagy

Gen çalyşmagy, gen terapiýasynyň iň “gönümel” görnüşidir, kemçilikli geni geniň adaty ýa-da ýabany görnüşli nusgasy bilen kesgitlemäge we çalyşmaga esaslanýar.Wezikulýar glýutamat daşaýjy 3 (VGLUT3) geniniň ýok edilmegi netijesinde eşidişiň ýitmegi üçin ilkinji üstünlikli içki gulak gen terapiýasy;Içki gulak saç öýjüklerinde (IHC) ekzogen VGLUT3 çakdanaşa gysyşyň AAV1 araçylyk bilen gowşurylmagy, eşidişiň dowamly dikelmegine, lentanyň bölekleýin sinaptiki morfologiýasynyň dikelmegine we konwulsion jogaplara sebäp bolup biler [4].Şeýle-de bolsa, ýokardaky girişde beýan edilen iki sany AAV gowşurylan gen çalşygyny öz içine alýan mysallarda, gen ýok etmegiň nesil yzarlaýyş bozulmalarynyň käbir görnüşleri üçin ulanylýan syçan modelleriniň adamlardan wagtlaýyn tapawutlydygyny, P1 syçanlarda bolsa içki gulagyň ösüşiň kämillik döwründe bolandygyny bellemek möhümdir.Munuň tersine, adamlar kämillik ýaşyna ýeten içki gulak bilen dogulýarlar.Bu tapawut, gen terapiýasy ýetişen syçan gulaklaryna berilmese, syçanjygyň netijelerini adamyň nesil ker kesellerini bejermekde ulanmagynyň öňüni alýar.

Gen redaktirlemesi: CRISPR / Cas9

“Gen çalyşmagy” bilen deňeşdirilende, gen redaktirleme tehnologiýasynyň ösüşi genetiki keselleri kökden bejermegiň daňyny getirdi.Möhümi, gen redaktirleme usuly agdyklyk edýän nesil ker kesellerine laýyk gelmeýän adaty aşa aşa gysyş gen terapiýa usullarynyň kemçiliklerini we çakdanaşa gysyş usulynyň uzak dowam etmeýän meselesini düzýär.Hytaýly gözlegçiler AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 gen redaktirleme ulgamyny ulanyp, Myo6WT / C442Y syçanlardaky Myo6C442Y mutant allelini ýörite kowandan soň, syçanlar modeliň eşidiş funksiýasy dikeldildi;şol bir wagtyň özünde içki gulakdaky saç öýjükleriniň diri galma derejesiniň gowulaşandygy, siliniň görnüşi yzygiderli bolýar we elektrofiziologiki görkezijiler düzedildi [5].Bu, dünýäde Myo6 gen mutasiýasy sebäpli dörän nesil kerligini bejermek üçin CRISPR / Cas9 tehnologiýasyny ulanan ilkinji gözlegdir we nesil kerligini bejermek üçin gen redaktirleme tehnologiýasynyň möhüm gözlegidir.Bejerginiň kliniki terjimesi berk ylmy esas berýär.

Gen bejergisini bermek usullary

Gen terapiýasynyň üstünlikli bolmagy üçin ýalaňaç DNK molekulalary gidrofilligi we fosfat toparlarynyň otrisatel zarýady sebäpli öýjüklere täsir edip bilmeýär we goşmaça nuklein kislotasy molekulalarynyň bitewiligini üpjün etmek üçin howpsuz we täsirli usul saýlanmalydyr.Goşmaça DNK maksat öýjügine ýa-da dokuma eltilýär.AAV ýokanç ýokanç täsiri, pes immunogenligi we dürli dokuma görnüşlerine giň tropizm sebäpli keselleri bejermek üçin giňden ulanylýar.Häzirki wagtda köp sanly gözleg işi, syçanjygyň kokleýasyndaky dürli öýjük görnüşlerine garanyňda AAV-iň dürli görnüşleriniň tropizmini kesgitledi.Öýjükli mahabatlandyryjylar bilen utgaşdyrylan AAV gowşuryş aýratynlyklaryny ulanmak, öýjükli maksatly täsirleri azaldyp biljek öýjüklere mahsus aňlatmany gazanyp biler.Mundan başga-da, adaty AAV wektorlaryna alternatiwa hökmünde täze sintetiki AAV wektorlary yzygiderli ösdürilýär we içki gulakda ýokary geçiş ukybyny görkezýär, şolardan iň köp ulanylýan AAV2 / Anc80L65.Wirus däl gowşuryş usullaryny mundan başga-da fiziki usullara (mikroinjeksiýa we elektroporasiýa) we himiki usullara (lipid esasly, polimer we altyn nanobölejikler) bölmek bolar.Iki çemeleşme hem nesil ker kesellerini bejermekde ulanyldy we dürli artykmaçlyklary we çäklendirmeleri görkezdi.Ulag hökmünde gen terapiýasy üçin gowşuryjy ulagdan başga-da, dürli maksatly öýjük görnüşlerine, dolandyryş ugurlaryna we bejeriş netijeliligine esaslanyp, wivo genini dolandyrmak üçin dürli çemeleşmeler ulanylyp bilner.Içki gulagyň çylşyrymly gurluşy, maksat öýjüklerine ýetmegi kynlaşdyrýar we gen redaktirleme serişdeleriniň paýlanyşy haýal.Membranous labyrint wagtlaýyn süňküň süňk labyrintinde ýerleşýär we kokleer kanalyny, ýarym töwerek kanalyny, utriklini we şary öz içine alýar.Onuň otnositel izolýasiýasy, limfa minimal aýlanyşygy we gandan labirint barýer bilen bölünmegi terapewtikanyň diňe neonatal syçanlara netijeli ulgamlaýyn iberilmegini çäklendirýär.Gen bejergisi üçin amatly wirus titrlerini almak üçin wirus wektorlaryny içki gulaga göni sanjym etmek zerurdyr.Döredilen sanjym ugurlary:

3-nji surat.Gen terapiýasynyň içki gulagy.

Kliniki terjime maksatlaryna esaslanyp, gen terapiýasynda köp öňegidişlik gazanylan hem bolsa, gen terapiýasy genetiki keseller bilen kesellänler üçin esasanam howpsuz we täsirli wektorlary we eltiş usulyny ösdürmekde ilkinji bejeriş usulyna öwrülmezden ozal has köp iş edilmeli.Emma, ​​ýakyn geljekde bu görnüşli bejergileriň şahsy bejerginiň esasy görnüşine öwrüljekdigine we genetiki näsazlyklary bolan adamlaryň we olaryň maşgalalarynyň durmuşyna gaty oňyn täsir etjekdigine ynanýarys.

Şeýle hem, “Foregene” çalt we RNK çykarmazdan ters transkripsiýa we qPCR reaksiýalaryny ýerine ýetirip bilýän maksatly genler üçin ýokary geçişli barlag toplumyny işe girizdi.

Haryt baglanyşyklary

Öýjük göni RT-qPCR toplumy - Taqman / SYBR REaşyl I.

Önüm barada has giňişleýin maglumat üçin habarlaşmagyňyzy haýyş edýäris:

overseas@foregene.com