PCR-iň döremegi
PCR （Polimeraza zynjyryň täsiri）
Polimeraza zynjyr reaksiýasynyň oýlanyp tapylmagyna 30 ýyldan gowrak wagt boldy.30 ýyldan gowrak wagtyň dowamynda, dünýädäki köp sanly alym üstüni ýetirmegi we kämilleşdirmegi dowam etdirenden soň, PCR tehnologiýasy tutuş Durmuş ylymlary pudagynda iň giňden we ýygy-ýygydan ulanylýan we iň möhüm gözleg usulyna öwrüldi.
Adaty PCR tehnologiýasynyň giňden ulanylmagy esasynda döredilen TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR we ş.m., şeýle hem täze dörän Sanly PCR (sanly PCR) ylmy gözlegçileriň köpüsiniň gözleg usullaryny ep-esli baýlaşdyrdy we häzirki zaman Durmuş Ylymlarynyň ösüş prosesini ep-esli çaltlaşdyrdy, esasanam molekulýar biologiýa, adamzadyň durmuşyny we tebigatyny öwrenmäge uly goşant goşdy.
Adaty PCR tehnologiýasynyň kemçilikleri
Çylşyrymly nuklein kislotasynyň bölünişi weçykarmak:
★ Adaty PCR tehnologiýasy: zerur
★ PCR alnan tehnologiýa: zerur
★ DNK we RNK nusgalary: uly tapawutlar, kyn iş talaplary
★ Bedeniň howpy: zäherli reagentler bedene zyýan berýär
Adaty PCR tehnologiýasy we emele gelen tehnologiýa hökmany-nuklein kislotasyny bölmek we arassalamak üçin zerur şertdir
Islendik biologiki nusga, PCR tehnologiýasynyň talaplaryna laýyk gelýän nuklein kislotasynyň nusgalaryny almak üçin birneme çylşyrymly we ýadaw nusga gaýtadan işlemeli.
DNK bilen RNK-ny bölmek we çykarmak, hemişe degişli ylmy gözlegçileriň her gün gaýtalamaly esasy meselesi bolupdy.
Nusgalaryň arasyndaky ägirt uly tapawutlar sebäpli DNK bilen RNK-nyň bölünişi we çykarylyşy hem gaty tapawutlanýar.Bu iş operatorlar üçin ýokary derejeli tehniki ussatlygy talap edýär.Adaty bölmek we çykarmak usullary käbir ýokary zäherli himiki reagentler bilen uzak möhletleýin aragatnaşyk talap edýär.Operatoryň bedenine öwezini dolup bolmajak zeper ýetirer, hatda synag wagtynda göni zeper ýetirer.
Şol bir wagtyň özünde, nuklein kislotalary öwrenmek, bölmek we çykarmak üçin köp sanly nusgasy bolanlar üçin köp zähmet talap edýän iş.
Bazardaky nuklein kislotasynyň izolýasiýasy we çykaryjy enjamlary indi kämillik ýaşyna ýetdi we markalar köp, ýöne takmynan birmeňzeş.Silisiýa jel membranasynyň sütün merkezden gaçyryş toplumy ýa-da magnitli monjuk usuly toplumy bolsun, köp wagt alýar we gaty gymmat.Kitabyň bahasyndan başga-da, laboratoriýa enjamlary üçin aýratyn talaplar hem bar.Magnit monjuk usulynda ulanylýan awtomatlaşdyrylan iş stansiýasy, adaty bir uly göwrümli ýokary bahaly enjam, bu laboratoriýa üçin gaty köp çykdajy.
Gysgaça
PCR synaglaryny geçirmezden ozal, gözlegçiler üçin nusgalaryň öňüni almak gutulgysyz we hemişe kelle agyrydyr.Bu meseläni nädip çözmeli we nuklein kislotalary bölmezden we çykarmazdan PCR synaglarynyň geçirilip bilinjekdigi hemişe ylmy gözlegçileriň we kliniki barlaghana işgärleriniň köpüsiniň pikiri.
Foregene çözgüdi
Göni PCR tehnologiýasy we şuňa meňzeş enjamlar boýunça ençeme ýyllap dowam eden gözleglerden soň, Forgene köp päsgelçilikleri üstünlikli ýeňip geçdi we güýçli garşylyk we uýgunlaşma bilen dürli nusgalaryň köpüsi üçin göni PCR-e üstünlikli ýetdi, bu gözlegçilere kyn we howply bölünişiklerden we nuklein kislotalary çykarmakdan dynmaga mümkinçilik berdi.Bu, her kimiň zähmet güýjüni ep-esli azaldar, synag işini çaltlaşdyrar we ylmy gözleg we synag çykdajylaryny tygşytlar.
DirectPCR-e düşünmegi we bilimi ýatdan çykaryň
Birinjiden, DirectPCR tehnologiýasy dürli biologiki nusga dokumalary üçin göni PCR tehnologiýasydyr.Bu tehniki şertde nuklein kislotalary aýyrmagyň we çykarmagyň zerurlygy ýok, dokumanyň nusgasy obýekt hökmünde gönüden-göni ulanylýar we PCR reaksiýasy üçin maksatly gen primerleri goşulýar.
Ikinjiden, DirectPCR tehnologiýasy diňe bir adaty DNK şablony güýçlendirmek tehnologiýasy bolman, eýsem RNK şablony ters transkripsiýa PCR-i hem öz içine alýar.
Üçünjiden, DirectPCR tehnologiýasy diňe bir dokumanyň nusgalarynda adaty ýokary hilli PCR reaksiýalaryny gönüden-göni ýerine ýetirmek bilen çäklenmän, eýsem real wagt qPCR reaksiýalaryny hem öz içine alýar, bu reaksiýa ulgamynyň fon floresan päsgelçiligine garşy durmak we endogen floresan söndürijilerine garşy durmak üçin güýçli ukyby talap edýär.
Dördünjiden, DirectPCR tehnologiýasyna gönükdirilen dokuma nusgalary diňe nuklein kislotasynyň şablonlarynyň çykmagyny talap edýär we PCR reaksiýasyna päsgel berýän beloklary, polisakaridleri, duz ionlaryny we ş.m. aýyrmaýar.Munuň üçin reaksiýa ulgamyndaky nuklein kislotasy polimeraza we PCR Mix-iň oňat tersine we uýgunlaşmagyna eýe bolmagy talap edilýär we çylşyrymly şertlerde fermentleriň işjeňligini we köpeltmegiň takyklygyny üpjün edip biler.
Bäşinjiden, DirectPCR tehnologiýasy bilen nyşana alnan dokuma nusgalary hiç hili nuklein kislotasyny baýlaşdyryş bejergisine sezewar edilmedi we reaksiýa ulgamynyň aşa ýokary duýgurlygyny we güýçlendirmek netijeliligini talap edýän şablonyň mukdary gaty az.
Netije
DirectPCR tehnologiýasy, PCR tehnologiýasy döräli bäri soňky 30 ýylda iň möhüm tehnologiki ösüşleriň we täzelikleriň biridir.Forgene bu tehnologiýanyň öňdebaryjy we täzelikçisi bolmagyny dowam etdirer we dowam etdirer.
DirectPCR tehnologiýasynyň amaly perspektiwasy gaty giňdir.Bu tehnologiýany yzygiderli kämilleşdirmek we wagyz etmek, elbetde, ylmy gözleg we gözleg işlerine ters üýtgeşmeler getirer.Bu PCR tehnologiýa öwrülişigi.
Iş wagty: 21-2017-nji fewral
