PCR reaksiýasynyň ajaýyp aýratynlygy, onuň güýçlendiriji kuwwaty we aşa ýokary duýgurlygydyr.PCR öndürijiligini we ýüze çykaryş netijeliligini ýokarlandyrmak üçin PCR güýçlendirmek ukybyny we ýüze çykaryş duýgurlygyny ýokarlandyrmagy maksat edinýäris, ýöne kelle agyry synag synagynda.Sealňyş pozitiwler köplenç ýüze çykýar we gaty az mukdarda haç hapalanmagy ýa-da PCR önüminiň hapalanmagy synagda ýalan pozitiwlere sebäp bolup biler.
PCR önüminiň hapalanmagynyň bäş görnüşi
PCR hapalanmagynyň köp sebäpleri bar, takmynan aşakdaky kategoriýalara bölüp bolar:
Specörite hapalanma, esasan, nusgany ýygnamak üçin konteýneriň hapalanmagy bilen ýüze çykýar ýa-da nusga ýerleşdirilende, boş möhürlenmegi sebäpli konteýnerden çykýar ýa-da nusga konteýneriň daşyna ýapyşýar, bu bolsa hapalanmaga sebäp bolýar;Hapalanmak, nusgalaryň arasynda hapalanmaga getirýär;käbir mikrob nusgalary, esasanam wiruslar aerozollar bilen ýaýrap ýa-da aerozol emele getirip, özara hapalanmagyna sebäp bolup biler.
Esasy sebäbi, PCR reagentleri taýýarlanylanda, nusga ýaragy, konteýner, goşa distillendirilen suw we beýleki erginler PCR nuklein kislotasynyň şablony bilen hapalanmagydyr.
Molekulýar biologiýa barlaghanalarynda we klonlaşdyrylan plazmidleri polo positiveitel gözegçilik hökmünde ulanýan käbir barlaghanalarda klonlanan plazmidiň hapalanmagy meselesi hem ýygy duş gelýär.Bölümiň göwrüminde klonlaşdyryş plazmidiniň düzümi gaty ýokary, arassalamak işinde has köp gural we reagent gerek, janly öýjükleriň plazmidi janly öýjükleriň güýçli ösmegi we köpelmek ukyby sebäpli hapalanmagy gaty ähtimal.
Güýçlendirilen önümleriň hapalanmagy PCR reaksiýalarynda iň köp ýaýran hapalanma meselesidir.PCR önüminiň göçürme mukdary köp (köplenç 1013 nusga / ml), bu PCR kesgitleme nusgasynyň çäginden has ýokary bolany üçin, PCR önüminiň hapalanmagy gaty az mukdarda ýalan pozitiwlere sebäp bolup biler.
Aerozolyň hapalanmagy, PCR önümleriniň hapalanmagynyň iň ähtimal görnüşidir we ünsden düşürmek iň aňsatdyr.Suwuk ýer bilen howanyň arasyndaky sürtülme netijesinde emele gelýär.Adatça, gapak açylanda, nusga islenende ýa-da reaksiýa turbasy güýçli silkende aerozolyň hapalanmagy emele gelip biler.Hasaplamalara görä, aerozol bölejigi 48,000 nusgany öz içine alyp biler, şonuň üçin ýüze çykýan hapalanma aýratyn ünsi çekmeli mesele.
Hususan-da, synag laboratoriýalary belli bir geni barlamak üçin köplenç şol bir jübüt primer ulanýarlar.Wagtyň geçmegi bilen laboratoriýa giňişliginde köp mukdarda PCR önüminiň hapalanmagy ýüze çykar.Şeýle hapalanma ýüze çykansoň, gysga wagtyň içinde ýok etmek kyn.
Hapalanmagyň ilkinji üç görnüşi üçin, öňüni almak üçin täsirli serişdeleri ulanyp bileris, ýöne PCR önümleri sebäpli döreýän hapalanmanyň öňüni almak kyn, esasanam standart däl PCR barlaghanalarynyň gurluşygynda.PCR prosesinde, turbanyň ujy suwuklygy sorup, uranda we PCR turba gapagy açylanda aerozol emele geler.Aerozol bilen göterilýän DNK molekulalary (bir aerozol on müňlerçe DNK göterip biler) howada ýüzýändigi sebäpli ýok etmek kyn.PCR synaglarynyň indiki tapgyry girizilenden soň, ýalan pozitiwler hökman ýüze çykar.
Aşakdaky suratda görkezilişi ýaly, otrisatel gözegçilik degişli gyzyklanma toparyny güýçlendirdi:
PCR-iň hapalanmagy we öňüni almak meselesiniň birinji bölümi şu ýerde hödürlenýär.Indiki sany size "PCR önümleriniň hapalanmagynyň öňüni almak" ikinji bölümini getirer, şonuň üçin üns beriň!
Iş wagty: Iýul-25-2017
