Wirus RNK-ny plazmadan, serumdan we beýleki nusgalardan arassalamak üçin izolýasiýa toplumy
Kitiň beýany:
Cat.No.RE-02011/02014
Wirus RNK-ny plazmadan, serumdan, öýjüksiz beden suwuklyklaryndan, öýjük medeniýeti adatdan daşary hadysalardan arassalamak üçin.
Wirus RNK-ny plazma, serum, öýjüksiz beden suwuklyklary we öýjük medeniýeti adatdan daşary hadysalary ýaly nusgalardan çalt izolirläň we arassalaň.
- RNK-nyň zaýalanmagy barada alada etmeli däl.Tutuş toplum RNase-Free
- pleönekeý - ähli amallar otag temperaturasynda tamamlanýar
- Çalt - operasiýa 20 minutda tamamlanyp bilner
- RNokary RNK hasyllylygy: Diňe RNK sütüni we üýtgeşik formula RNK-ny arassalap biler
- Howpsuz - organiki reagent ulanylmaýar
- Uly nusga gaýtadan işlemek kuwwaty - her gezek 200μl nusga gaýtadan işlenip bilner.
Highokary hilli - arassalanan RNK gaty arassa, belokdan we beýleki hapalardan azat we dürli aşaky synag synaglaryna laýyk bolup biler.
Düşündirişler
Kitapda plazma, serum, öýjüksiz beden suwuklygy we öýjük medeniýeti adatdan daşary tebigaty ýaly nusgalardan ýokary arassalygy we ýokary hilli wirus RNK-ny netijeli çykaryp bilýän Foregene tarapyndan işlenip düzülen aýlaw sütüni we formulasy ulanylýar.Kitapda nusgalardan az mukdarda RNK alyp bilýän çyzykly akrilamid aýratyn goşulýar.Diňe RNK sütüni RNK-ny netijeli baglanyşdyryp biler.Kitap bir wagtyň özünde köp sanly nusgany gaýtadan işläp biler.
Tutuş toplumda RNase ýok, şonuň üçin arassalanan RNK peselmez.Bufer viRW1 we Buffer viRW2 alnan wirusly nuklein kislotasynyň aşaky akym molekulýar biologiýa synaglarynda gönüden-göni ulanylyp bilinjek belok, nukleaz ýa-da beýleki hapalardan azat bolmagyny üpjün edip biler.
Aýratynlyklary
50 Taýýarlyk, 200 Taýýarlyk
Kit komponentleri
| Çyzykly akrilamid |
| Bufer viRL |
| Bufer viRW1, Bufer viRW2 |
| RNase-ddH2O |
| Diňe sütün |
| Görkezmeler |
Aýratynlyklary we artykmaçlyklary
- RNK-nyň zaýalanmagy barada alada etmeli däl.Tutuş toplum RNase-Free
- pleönekeý - ähli amallar otag temperaturasynda tamamlanýar
- Çalt - operasiýa 20 minutda tamamlanyp bilner
- RNokary RNK hasyllylygy: Diňe RNK sütüni we üýtgeşik formula RNK-ny arassalap biler
- Howpsuz - organiki reagent ulanylmaýar
- Uly nusga gaýtadan işlemek kuwwaty - her gezek 200μl nusga gaýtadan işlenip bilner.
Highokary hilli - arassalanan RNK gaty arassa, belokdan we beýleki hapalardan azat we dürli aşaky synag synaglaryna laýyk bolup biler.
Kitiň parametrleri
Kitap programmasy:
Wirusly RNK-ny plazma, serum, öýjüksiz beden suwuklygy we öýjük medeniýeti adatdan daşary tebigaty ýaly nusgalarda çykarmak we arassalamak üçin amatlydyr.
Iş akymy
Saklamak şertleri
- Kitap otag temperaturasynda (15-25 ℃), ýa-da 2-8 longer has uzak wagtlap saklanyp bilner.
- Çyzykly akrilamid ergini, otag temperaturasynda 7 gün saklanyp bilner.Kitaby alanyňyzdan soň, çyzykly akrilamid erginini çykaryň we -20 at derejesinde saklaň.
-Bafer viRL-e çyzykly akrilamid goşanyňyzdan soň, 2-8 at 48 sagada çenli saklanyp bilner.Täze taýýarlanan çözgüdi ulanyň.
Meseleleriň derňewi üçin gollanmalar
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Hiç bir RNK çykaryp bolmaýar ýa-da nuklein kislotasynyň hasyllylygy pes
Adatça dikeldiş netijeliligine täsir edýän köp faktor bar, mysal üçin: RNK mazmuny, iş usuly, elýusiýa göwrümi we ş.m.
Umumy sebäpleriň derňewi ：
1. Işleýän wagtyňyz hammam ýa-da pes temperatura (4 ° C) merkezden gaçyryş.
Teklip: Otagyň temperaturasy (15-25 ° C), hiç haçan buz wannasy we pes temperatura sentrifugasy.
2. Nädogry nusga saklanyşy ýa-da nusga saklanyşy gaty uzak.
Teklip: Nusgalary -80 ° C derejesinde saklaň ýa-da suwuk azotda doňduryň we doňdurmagyň gaýtadan ulanylmagyndan gaça duruň;RNK çykarmak üçin täze ýygnanan nusgalary ulanmaga synanyşyň.
3. ampleterlik nusga lizisi
Teklip: Nusga bilen iş ergininiň (Çyzykly akrilamid) gowy garylyp, otag temperaturasynda (15-25 ° C) 10 minut inkubasiýa edilendigine göz ýetiriň.
4.Eluent nädogry goşuldy
Teklip: Arassalaýyş sütüniniň membranasynyň ortasyna RNase-Free ddH2O goşulandygyna göz ýetiriň.
5. Buffer viRW2-de suwuk etanyň nädogry göwrümi
Teklip: Görkezmelere eýeriň, Buffer viRW2-e suwuk etanolyň dogry mukdaryny goşuň we toplumy ulanmazdan ozal gowy garmaly。
6. Nädogry nusga ulanylyşy.
Teklip: Buffer viRL-den 500μl üçin 200µl nusga.Artykmaç nusga göwrümi RNK çykarmagyň peselmegine getirer.
7. Nädogry elitasiýa göwrümi ýa-da doly däl elitasiýa.
Teklip: Arassalaýyş sütüniniň uzynlygy 30-50μl;elitasiýa effekti kanagatlanarly däl bolsa, öňünden gyzdyrylan RNase-Free ddH goşmak maslahat berilýär2O we otag temperaturasynda 5-10min ýaly wagt goýuň
8.Purifikasiýa sütüninde Buffer viRW2-de ýuwlandan soň etanol galyndysy bar.
Teklip: Bufer viRW2-de ýuwlandan we 2 minut boş turba merkezden gaçyryşdan soň etanol galan bolsa, arassalanan sütün galan etany doly aýyrmak üçin boş turba merkezden gaçyryşdan soň 5 minut otag temperaturasynda galdyrylyp bilner.
Arassalanan RNK molekulalarynyň zaýalanmagy
Arassalanan RNK-nyň hili, nusga saklamak, RNase hapalanmagy we işleýşi ýaly faktorlar bilen baglanyşykly.
Umumy sebäpleriň derňewi ：
1. Theygnalan nusgalar wagtynda saklanmady.
Teklip: Eger nusga ýygnanandan soň ulanylmasa, derrew -80 at ýa-da suwuk azotda saklaň.RNK molekulalaryny çykarmak üçin mümkin boldugyça täze ýygnanan nusgalary ulanmaga synanyşyň.
2.Ygnanan nusgalar doňup, ereýärdi.
Teklip: Nusga ýygnamak we saklamak wagtynda gaýta-gaýta doňdurmakdan we eremekden gaça duruň (ýogsam nuklein kislotasynyň hasyly azalýar).
3.RNase operasiýa otagynda girizildi ýa-da bir gezek ulanylýan ellikler, maskalar we ş.m.
Teklip: RNK molekulalarynyň synagyny çykarmak aýratyn RNK operasiýa otagynda iň oňat ýerine ýetirilýär we tejribe tablisasy synagdan öň arassalanýar.Synag wagtynda bir gezek ulanylýan ellikleri we maskalary geýiň, RNase girizilmegi netijesinde ýüze çykýan RNK zaýalanmazlygy üçin.
4. Reagent ulanylanda RNase bilen hapalanýar.
Teklip: Baglanyşykly synaglar üçin täze Wirus RNK izolýasiýa toplumyny çalyşyň.
5. Merkezden gaçyryş turbalarynyň, turbageçirijileriň we ş.m. RNase hapalanmagy Teklip: Merkezden gaçyryş turbalarynyň, turbalaryň uçlarynyň we turbalarynyň hemmesiniň RNase-ýokdugyna göz ýetiriň.
Arassalanan RNK molekulalary aşaky synaglara täsir etdi
Arassalaýyş sütüni bilen arassalanan RNK molekulalary, duz ionlary ýa-da beloklar gaty köp bolsa, aşakdaky synaglara täsir eder, meselem: ters transkripsiýa, Demirgazyk Blot we ş.m.
1.Saýlanan RNK molekulalarynda duz ionlary bar.
Teklip: Buffer viRW2-e dogry suwly etanolyň goşulandygyna göz ýetiriň we arassalaýyş sütünini iş görkezmelerinde dogry sentrifugasiýa tizligine görä iki gezek ýuwuň still Duz ionlary galan bolsa, arassalaýyş sütünine Buffer viRW2 goşup, otag temperaturasynda 5 minut goýup bilersiňiz.Soňra duz ionlarynyň hapalanmagyny iň ýokary derejede aýyrmak üçin merkezden gaçyryş işini ýerine ýetiriň
2.Saýlanan RNK molekulalarynda galan etanol bar
Teklip: arassalaýjy sütünleriň Buffer viRW2 tarapyndan ýuwlandygyny tassyklandan soň, iş görkezmelerinde merkezden gaçyryş tizligine laýyklykda boş turba merkezden gaçyryş işini ýerine ýetiriň.Etanol galan bolsa, galan etanoly iň ýokary derejede aýyrmak üçin boş turba merkezden gaçyryşdan soň otag temperaturasynda 5 minut goýup bolýar.
Gollanma gollanmalary:
Wirus RNK izolýasiýa toplumynyň görkezmesi
