• facebook
  • Baglanyşyk
  • youtube

Näçe bilýärsiň

N hakdauke kislotasyny çykarmak

Arassalanan nuklein kislotasynyň başlangyjy we soňy

Başda hemme zat kyn, arassalanan nuklein kislotasy iň köp

Soňky synaglar üçin molekulýar synaglaryň başlangyjy

Üstünlik ýa-da şowsuzlyk möhüm täsir edýär.

Yz / ultra yz UV spektrofotometri köp ylmy gözlegçiler tarapyndan makullanýar, sebäbi nuklein kislotasynyň konsentrasiýasyny we belok we duz ion galyndylaryny ýönekeý, çalt we ykdysady taýdan kesgitläp bilýär.

Hemmämiziň bilşimiz ýaly, A260 nuklein kislotasynyň siňdirilişiniň OD bahasyny, A280 belok konsentrasiýasynyň siňdirilişiniň OD bahasyny aňladýar, A230 duz ionynyň konsentrasiýasynyň OD bahasyny aňladýar, şonuň üçin A260 nuklein kislotasynyň konsentrasiýasyny üýtgedip biler, A260 / 280 belok galyndysyny aňladýar, A260 / 230 duz ionynyň galyndysyny aňladýar, ýöne bu köp sanly gözlegçiler tarapyndan açylan düzgün.adatyDNK bilen RNK-nyň arassalygyny düşündirip biljekdigine ynanmakbelli bir derejede.Nuklein kislotasynyň hasyllylygyny we arassalygyny kesgitlemek üçin ýeke-täk standart däl, diňe salgylanma hökmünde ulanylýar we “altyn standart” däl.

derthfd (1)

Termo Fisher ND-2000 gollanmasy synag netijeleriniň ygtybarlylygyny nygtaýar

Munuň sebäbi mikro / ultramikro UV spektrofotometri ulanmak arkaly alnan netijeleriň diňe nuklein kislotasynyň öndürijiligini we arassalygyny görkezýändigi we täsir ediji faktorlaryň köpdügi (optiki ýol, nusga göwrümi, nusga konsentrasiýasy, pH bahasy, siňdiriş ölçegine täsir edýän beýleki ionlar we ş.m.), ölçenen OD bahasy hökman takyk däl.Şol bir wagtyň özünde, siňdiriş bahasyny kesgitleýän materialyň aýratynlygynyň ýoklugy sebäpli, bir hatar DNK, iki hatar DNK, RNK, DNTP we käbir beloklaryň hemmesiniň 260nm tolkun uzynlygynda siňdiriş derejesi bar we diňe A260 tarapyndan kesgitlenen konsentrasiýa hakyky DNK ýa-da RNK däl.Konsentrasiýa, onuň bitewiligine we peselmegine baha berip bolmaz.

Arassalanan nuklein kislotamyzyň hiline nädip baha bermeli?Tapmak üçin mikro / ultramikro UV spektrofotometri ulanmakdan başga-da, nuklein kislotasynyň arassalygyny we bitewiligini wizual görkezmek we belli bir derejede konsentrasiýany görkezmek üçin agarose gel elektroforezi ýaly usullar hem talap edilýär.Şeýlelik bilen, dürli usullaryň ýüze çykaryş netijelerinden alnan nuklein kislotasynyň öndürijiligi we arassalygy ygtybarlydyr.

Synag diagrammasyny deňeşdirmek

derthfd (2)

H1299 öýjükleriniň genom DNK-sy A kompaniýasynyň DNK çykarmak toplumlaryndan peýdalanyp alyndy we ep-esli hapalanma hapalandy, netijede ýokary OD bahalary ýüze çykdy

(OD ölçeg bahasy we degişli elektroferogramma)

Bahalandyryş indeksi

Nuklein kislotasynyň hasyllylygy we hilini barlamak üçin “altyn standart” barmy?

Bilşimiz ýaly ýönekeý, çalt we arzan usul ýok.Spektrofotometr, gel elektroforezi ýa-da köpçülik spektrometri bolsun, bularyň hemmesi ergindäki nuklein kislotasynyň konsentrasiýasyny we arassalygyny dürli tarapdan görkezýär we biri-birine salgylanyp höküm edilmeli.

Iň gowy baha beriş indeksi hemişeindiki synag amaly.Ters transkripsiýanyň we PCR güýçlendirmegiň netijeliligine täsir etmeýär.Ygtybarly güýçlendiriji önümleri we Ct bahalaryny almak we yzygiderlilik bilen doly yzygiderliligi almak nuklein kislotasyny üstünlikli çykarmakdyr.

Jemläp aýtsak, diňe gatnaşygy bolan nazaryýetiň pikiri, “aşaky akym synag synaglaryny gowy çykarmak parametrleri hökmünde ulanmak” pikiri bilen garşy çykmaly!

Eokary DNK / RNK arassalygyny almak üçin Foregene DNK RNK çykarmak toplumlary:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/


Iş wagty: 14-2022-nji dekabry