Giriş:

RNK, ylmy ady ribonuklein kislotasy, gysgaltmasy RiboNuklein kislotasyndan gelip çykýar, fosfodester baglanyşyklary arkaly azyndan onlarça ribonukleotidleri birleşdirmek arkaly emele gelen nuklein kislotasynyň bir görnüşidir.

RNK-ny öwrenmegiň esasy, hapalanmazdan jemi RNK çykarmakdyr we RNK çykarmagyň esasy ýörelgesini takmynan aşakdaky ýaly jemläp bolar:

1. Ilki bilen öýjükleri bozuň

2. Soňra makromolekulýar hapalary aýyryň (beloklar, lipidler, DNK we ş.m.)

3. Netijede, duzlary we organiki erginleri aýyrmak we RNK-ny hasam arassalamak bilen RNK çökýär

Gazyp almagyň usulynyň geçmişi we şu güni

RNK çykarmak usulynyň ilkinji nesli, Pýotr Çomçinski we enesi Nikoletta Sakçi tarapyndan oýlanyp tapylan TRIzol ýagyş usulydyr (ulanylýan reagentlere guanidin izotiosýanat, fenol, hloroform we ş.m.), sebäbi bu oýlap tapyş RNK gözlegine başlaýar we şondan bäri RNK gözlegine başlaýar.

Soň atam bu patenti Invitrogen-e satdy we Invitrogen bu usuly dünýä tanatdy we giňden ulanylýan usula öwrüldi.

Soň bolsa Invitrogen Termo tarapyndan satyn alyndy!

Wekil önümi: Invitrogen-iň TRIzol reagenti

Şeýle-de bolsa, TRIzol ýagyş usuly birnäçe ýagyş we RNK çykarmagy talap edýär we ulanylýan reagentler zäherlidir we işlemek üçin köp wagt alýar.

Şonuň üçin ikinji nesil sütün-fermentleri arassalamak usuly, beýleki hapalary aýyrmak bilen nusgadaky RNK-nyň dikelmegini ýokarlandyrmak üçin kremniniň gel membranasyny belli bir nuklein kislotasynyň adsorbsion materialy hökmünde ulanyp ýüze çykdy.

Ikinji nesil usuly durnukly öndürijilik esasynda amaly ýönekeýleşdirýär, töwekgelçilik faktoryny peseldýär we RNK çykarmagyň netijeliligini ýokarlandyrýar.

Wekil önümleri: QIAGEN RNeasy we içerki önümleriň köpüsi

Şeýle-de bolsa, birinji we ikinji nesil usullary DNase hapalanmagyny aýyrmak üçin DNase-den peýdalanmagy talap edýär, bu bolsa aşaky akym synaglarynda käbir oňaýsyzlyklary döredýär.Galyndy DNase ters transkripsiýanyň netijeliligini peselder we birinji hatar cDNA sintezini azaldar we şeýlelik bilen netijeleriň takyklygyna täsir eder.

Şonuň üçin üçünji nesli çykarmak usuly ikinji nesliň esasynda optimallaşdyrylýar.Synagda hiç hili ferment goşmak zerurlygy ýok we RNK-ny diňe iki sütün bilen aňsatlyk bilen alyp bolýar.

1-nji sütün: DNK-ny arassalamak üçin sütün

2-nji sütün: Diňe RNK sütüni RNK-ny ýöriteleşdirýär we dikeldýär

Şeýle ýönekeý amal diňe bir wagt tygşytlaman, eýsem aşaky synaglaryň işlemegini hem aňsatlaşdyrýar!

Wekil önümleri: QIAGEN RNeasy Plus weForegeneRNK arassalaýyş önümleri

（RNeasy Plus）

（Foregene'sÖsümlikleriň jemi RNA izolýasiýa toplumy）

Arkaýyn aýdyň!Foregene-iň RNK toplumy, adam bedenine zäherli maddalar goşmazdan, 1 minutda gaty ýerdäki 400μg RNase-ni doly aýyryp bilýän, aňsat ulanylýan RNase Eraser-i hödürleýär!

Surat1: Amal prosesini deňeşdirmek diagrammasy

“Foregene” -niň önümleri diňe iki aýdymda RNK çykarmagy tamamlap biler, synag tejribäňize beýlekileri gabanjaň etmäň!

Surat2:Experimental netijeler deňeşdirme diagrammasy

Birinji nesil (1: TRIzol)

Ikinji nesil (2: QIAGEN-iň aňsatlygy)

Üçünji nesil (3: QIAGEN-iň RNeasy plus, 4: Foregene)

Surat3: qPCR grafigi (güýçlendirme egri grafigi)

Birinji nesil (ýaşyl TRIzol diýmekdir, gyzyl TRIzol + diýmekdir)

Ikinji nesil (asman gök “QIAGEN RNeasy”, gyzyl “QIAGEN RNeasy” diýmekdir)

Üçünji nesil (gök “QIAGEN RNeasy plus”, ýaşyl “Foregene” diýmekdir)

.

Her tehniki kämilleşdiriş, synagyň işiniň has ýönekeý we has amatly ugurda ösýändigini aňladýar.

Foregene has köp ylmy gözlegçiniň tejribe wagtyny we çykdajylaryny tygşytlamagyna, ýokary hilli synag netijelerini almaga we bilelikde has gymmatly ylmy gözleg üstünliklerini döretmäge kömek etmegi maksat edinýär.