Lnc-RT Gahryman I (gDNase bilen) (lncRNA-dan birinji hatar cDNA sintezi üçin Super Premiks)
Aýratynlyklary
25×20μl Rxns, 50 ýaş×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase bilen), genom DNK hapalanmagyny çalt aýyrmak üçin lncRNA üçin ýörite işlenip düzülen ters transkripsiýa ulgamy.5 × gDNase Mix, RNK-da galan genomy 42 ° C-de 2 minutlap çalt aýyryp biler, bu bolsa geniň qPCR netijelerine päsgel bermeginiň öňüni alar.
5 × L-RT HeroTM garyndysynda Forenene tarapyndan ýörite işlenip düzülen Foregene LncRNA ters transkriptazasy bar, bu RNK ýakynlygy we has ýokary ters ýazgy netijeliligi bilen ýörite lncRNA we beýleki uzyn RNA çylşyrymly şablonlary üçin ters transkriptazanyň täze görnüşi.Optimallaşdyrylan ulgam ters transkripsiýa tizligini has çaltlaşdyrýar we ýokary GC mazmuny we çylşyrymly ikinji derejeli RNK şablonlaryny aňsatlyk bilen ýazyp bilýär.Ilkinji simli cDNA sintezi 42 minutda 15 minutda tamamlanyp bilner.
Kit komponentleri
| 5× gDNase garyndysy |
| 5× L-RT Gahryman garyndysy |
| RNase-ddH2O |
| Görkezmeler |
Aýratynlyklary we artykmaçlyklary
■Şablondaky gDNA-ny 2 minudyň içinde aýryp bilýän gDNA-ny aýyrmak üçin täsirli ukyp.
L lncRNA transkripsiýasyny netijeli tersine alyp biler.Ters transkripsiýa önümi qPCR-e sezewar bolanda, Ct bahasy adaty ters transkripsiýa ulgamyndan pesdir.
■ Netijeli ters transkripsiýa ulgamy, birinji setir CDNA-nyň sintezini tamamlamak üçin bary-ýogy 15 minut gerek.
■ Çylşyrymly şablonlar: ýokary GC mazmuny we çylşyrymly ikinji derejeli şablonlar hem ýokary netijelilik bilen tersine bolup biler.
■ sensokary duýgurlyk ters transkripsiýa ulgamy, pg derejeli şablonlar hem ýokary hilli cDNA alyp bilerler.
Ters Ters transkripsiýa ulgamy ýokary ýylylyk durnuklylygyna, iň amatly reaksiýa temperaturasyna 42℃, we 50-de gowy ters transkripsiýa ýerine ýetirijiligi bar℃.
Kit toplumy
lncRNA degişlilikde mukdar derňewi.
lncRNA mutlak mukdar derňewi.
RNK wirusy ýaly yz RNK-ny çalt we takyk seljerip biler.
Cokary GC mazmuny ýa-da çylşyrymly ikinji derejeli RNK şablonlarynyň ters transkripsiýasy.
Iş akymy
Saklamak we ýaramlylyk möhleti
Kitap -20-de saklanmalydyr°C. Önümi hemişelik temperatura sowadyjyda -20-de saklaň°Alandan soň derrew C.Saklamak şertleri laýyk bolsa, önüm 1 ýyllyk möhletde hiç hili öndürijiligini peseltmez.
Mesele derňew gollanmasy
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-ýörite güýçlendirme
1. Esassyz deslapky dizaýn
Teklip: Astar dizaýn ýörelgelerine laýyklykda dizaýn desgalary.
2. Genom galyndylary.
Teklip: GDNA-ny aýyrmagyň reaksiýasynyň temperaturasynyň ilkinji ädiminiň 42 ° C, reaksiýa wagtynyň 5 minuda çenli uzaldyljakdygyna göz ýetiriň.
RT-qPCR tarapyndan güýçlendiriji signal ýok
1. RNK zaýalanýar.
Teklip: RNK çykarmak üçin material mümkin boldugyça täze bolmaly we ýokary hilli we ýokary arassa RNK ulanylmaly.
2. RNK ingibitorlary öz içine alýar.
Teklip: Tersine transkripsiýa ingibitorlary, adatça, SDS, guanidin duzlary, EDTA we ş.m. öz içine alýar, ingibitorlary aýyrmak üçin RNK çökündilerini 70% etanol bilen ýuwmak maslahat berilýär.
3. Esasy dizaýn meseleleri.
Teklip: Astar dizaýn ýörelgesine laýyklykda, desgalary gözden geçirmek üçin täzeden düzüň.
Maksat zolagy boş dolandyryşda peýda bolýar
1. Işleýiş gurallarynyň ýa-da reagentleriň hapalanmagy.
Teklip: Synag üçin ähli reagentler ýa-da enjamlar awtoklaw bolmaly.DNK nusgalarynyň turba siňdirilmezligi ýa-da merkezden gaçyryş turbasyndan dökülmezligi üçin seresap we mylaýym boluň.
2. Hapalanma PCR reaksiýa ulgamy taýýarlanylanda ýüze çykdy.
Teklip: Işledilende zerur çäreleri görüň, meselem: lateks ellik geýmek, süzgüç maslahatlaryny ulanmak.Hapalanma garşy ulgamda Real Time PCR Mix ulanyň.
3. Astarlar peseldi.
Teklip: Astarlaryň zaýalanandygyny ýa-da ýokdugyny anyklamak üçin SDS-PAGE elektroforezini ulanyň we floresan kesgitlemek synaglary üçin täze primerler bilen çalşyň.
Gollanma:
Lnc-RT HeroTM I (gDNase bilen) (lncRNA-dan birinji hatar cDNA sintezi üçin Super Premiks) Gollanma
